Investigation of delayed type hypersensitivity response against crimean-congo hemorrhagic fever virus nucleoprotein
Kırım kongo kanamalı ateşi virüsü nükleoproteinine karşı oluşan gecikmiş tip hipersensitivite cevabının araştırılması
- Tez No: 464943
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ZİYA DOYMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Biyoteknoloji, Genetics, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Bezm-İ Alem Vakıf Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Kırım Kongo Kanamalı Ateşi Virüsünün (KKKAV) yol açtığı Kırım Kongo Kanamalı Ateşi (KKKA) çok geniş bir coğrafyada etkin olan ve %5 ile %50 arasında değişen fatalite oranına sahip bir hastalıktır. KKKAV Bunyaviridae ailesinin bir üyesi olup, Nairovirus cinsi altında sınıflandırılmaktadır. KKKAV genomu üç tane negatif sarmallı RNA segmentlerden oluşmaktadır. RNA'ya bağlı viral RNA polimerazı L segment tarafından üretilmektedir. S segment nükleoproteinleri, M segment ise Gn ve Gc proteinlerini kodlamaktadır. Viral replikasyonun ve transkripsiyonun konakçı hücrede başlayabilmesi için tüm segmentlerin nücleoproteinler (NP) tarafından sarmalanması gerekmektedir. KKKAV S segmenti 53 kDa ağırlığındaki NP kodlamaktadır. KKKA genellikle hafif ve spesifik olmayan ateşli bir hastalık olarak rapor edilmiştir ancak bazı vakalarda çok şiddetli hemorajik hastalık gelişebilmektedir. Hastalığın 5 ile 14. günleri arasında devam eden hemoraji, çoklu organ bozukluğu ve şok ile sonuçlanabilmektedir. Viral enfeksiyonlarla mücadele esnasında, hücre aracılı immünite önemli bir rol oynamaktadır. Bu yüzden KKKAV enfeksiyonlarının hücresel immünite üzerindeki rolünü aydınlatmak oldukça önemlidir. Bu amaçla, çalışmamızda hayvan modellerinde KKKAV'ye karşı oluşacak gecikmiş tip hipersensitivite (delayed type hypersensitivity- DTH) reaksiyonunun varlığının araştırılması hedeflenmiştir. Bu amaçla, KKKAV NP (1449 bç), NP'nin N-terminal parçası, NPNT (387 bç) ve NP'nin C-terminal parçası, NPCT (513 bç) rekombinant olarak prokaryotik ekspresyon sistemlerinde üretilerek DTH üzerindeki etkileri araştırılmıştır. Fare immunizasyon çalışmalarının ardından üç farklı dozda (50 μg/μl, 100 μg/μl, 200 μg/μl) antijen fare ayak tabanlarına enjekte edilmiş ve ayak tabanındaki şişme elektronik kumpas aleti ile ölçülmüştür. Yirmi dördüncü saatte oluşan DTH cevabı her bir protein için en yüksek değeri göstermiş ve 72. saate doğru bu cevap azalmıştır. Antijen enjekte edilen sağ ayak tabanındaki şişlik, kontrol grubuna kıyasla istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p<0,05). DTH reaksiyonu oluşturmak için 100 μg/μl ideal doz olarak saptanmıştır. Bu çalışmada KKKAV NP'nin CD4+ T hücre epitoplarına sahip olduğu ve Nterminal kısmın C- terminale göre daha güçlü bir antijenite geliştirdiği gözlemleniştir. Hücresel immüniteyi tetikleyen viral proteinlerin rolü henüz tam olarak bilinmediği için, bu çalışmaların KKKAV hakkındaki bilgiye katkıda bulunacağı düşünülmektedir. Bu bilgiler ayrıca aşı tasarımı ve antiviral terapi stratejilerinin geliştirilmesi amacıyla kullanılabilecektir.
Özet (Çeviri)
Crimean–Congo hemorrhagic fever (CCHF) caused by CCHFV is reported in a wide geographic range with a fatality rate ranging from 5 to 50 %. CCHFV is a member of the family Bunyaviridae and classified in Nairovirus genus. CCHFV genome is composed of tripartite single-stranded negative RNA segments, and RNA dependent viral RNA polymerase is produced by L segment. S segment encodes nucleoprotein (NP) and M segment expresses Gn and Gc. To initiate the viral replication and transcription in the host cell, the segments are needed to be encapsidated by NP. The S segment of CCHFV encodes 53 kDa NP made up of globular domain with a prominent arm. CCHFV infection is generally reported as a mild, nonspecific febrile illness but in some cases, severe hemorrhagic disease is also developed. Persisting hemorrhage, multi-organ failure and shock result in fatality on day 5-14 of illness. In combatting against viral infections, CMI plays a pivotal role. Therefore it is essential to clarify the role of cellular immunity in CCHFV infection. In this study, we aimed to investigate the presence of delayet type hypersensitivity (DTH) reactions against CCHFV in an animal model. For this purpose, CCHFV NP (1449 bp), N-terminal part of NP, NPNT (387 bp) and C-terminal part of NP, NPCT (513 bp) were recombinantly produced in procaryotic expression systems and investigated their effect on DTH. Following immunization steps, antigens were injected in three different dosage (50 μg/μl, 100 μg/μl, 200 μg/μl) and footpad swelling was measured by an electronic caliper. For each protein, DTH response has peaked at 24 hr and decreased by 72 hr. Footpad swelling was statistically significant on right hind pad injected with antigen for each groups, compared to negative control (p<0,05). 100 μg/μl was found to be optimum dose for DTH response. The results of this study demonstrate that, CCHFV NP contains CD4+ T cell epitopes and N-terminal part of CCHFV NP developed stronger antigenicity than C-terminal part. Because, the exact role played by each protein in developing a cellular immunity against the whole virus have not been studied in detail, any information on the individual proteins and on the cellular immune response will be a wellcomed addition to the data on CCHFV. These information would be used in developing strategies in designing vaccines as well as on antiviral approaches.
Benzer Tezler
- İmmunostimulan polimerler ile attenüe edilmiş Leismania parazitlerinin aşı olarak etkinliğinin in vitro ve in vivo incelenmesi
In vitro and in vivo investigation of effectiveness of attenuated Leishmania parasites by immunostimulant polymers as a vaccine
SERHAT ELÇİÇEK
Doktora
Türkçe
2013
Allerji ve İmmünolojiYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MELAHAT BAĞIROVA
- Atopik dermatitli çocuklarda in vivo ve in vitro yöntemle hücresel bağışıklığın araştırılması
Investigation of cellular immunity in children with atopic dermatitis by in vivo and in vitro methods
NUR EFE İRİS
Doktora
Türkçe
2000
Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul Üniversitesiİmmünoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ÜLKER ÖNEŞ
- RD1-Elispot testine karşılık tüberküloz testi:Temaslı çocuklarda tüberküloz enfeksiyonu epidemiyolojisi
Başlık çevirisi yok
AHMET SOYSAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2004
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıMarmara ÜniversitesiPediatri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA BAKIR
- Pestisitlerin olası genotoksik ve immünotoksik etkilerinin değerlendirilmesi
Determination of genotoxic and immunotoxic effects of pesticides
ÜLKÜ ÜNDEĞER
Doktora
Türkçe
2001
Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe ÜniversitesiFarmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURŞEN BAŞARAN
- Nötral tipteki zaman gecikmeli dinamik yapay sinir ağlarının kararlılık özelliklerinin incelenmesi
The investigation of stability properties of neutral type time delayed dynamic neural networks
ZELİHA DOĞAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaBilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. RÜYA ŞAMLI
DOÇ. DR. EYLEM YÜCEL DEMİREL