İn-vitro ortamda farklı kaynaklardan elde edilen mezenkimal kök hücrelerde adrenerjik reseptörlerin gösterilmesi ve reseptör blokajının farklılaşmaya etkisi
Investigation of adrenergic receptors in mesenchymal stem cells obtained from different sources in vitro and influence of receptor block on differentiation
- Tez No: 445330
- Danışmanlar: PROF. DR. FAZİLET AKSU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Hücre farklılaşması, Kök hücreler, Polimeraz zincirleme reaksiyonu, Reseptörler-adrenerjik, İn vitro, Cell differentiation, Stem cells, Polymerase chain reaction, Receptors-adrenergic, In vitro
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Çukurova Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Farklı kaynaklardan elde edilen mezenkimal kök hücreler (MKH) günümüzde immünomodülatör ve rejeneratif amaçlı kullanılmaktadır. Bu hücreler adezyon molekülleri, hematopoetik belirteçler ve immünolojik belirteçler açısından sıklıkla araştırılmıştır. MKH'lerde adrenerjik reseptörlerin varlığını gösteren çok sınırlı sayıda çalışma vardır. Bu hücrelerin üretim aşamalarında ve farklılaşmalarında reseptör ifadeleri konusunda yeterli bilgi mevcut değildir. Ayrıca farklı kaynaklardan elde edilen MKH'lerde reseptör ifadelerinin nasıl olduğu da bilinmemektedir. Bu çalışmada insan plasenta fetal membranı (FM) ve kemik iliğinden (Kİ) elde edilen MKH'lerde, rejeneratif ve immünomodülatör amaçlı olarak sıklıkla kullanıldıkları 1., 2. ve 3. pasajda, adrenerjik reseptörlerin α1A, α1B, α2A, α2B, β1, β2, β3 altgruplarına ait mRNA ekspresyonları RT-qPCR ile gösterildi. Resepörlerin mRNA ekspresyonları bu hücrelerin osteojenik, adipojenik farklılaşmasında ve blokör etkisindeki farklılaşmasında da aynı yöntemle gösterildi. Blokörlerin osteojenik farklılaşmaya etkisinin tespit edilmesi amacıyla Kemik Morfogenetik Protein (BMP-6) ve adipojenik farklılaşmaya etkisinin tespit edilemesi amacıyla Peroksizom Proliferatör-Aktive Reseptör Gama (PPARγ)'nın mRNA ekspresyonları RT-qPCR ile araştırıldı. Çalışmamızda, kontrol grubu olan 1. pasaja göre en yüksek mRNA ekspresyon oranı Kİ kaynaklı MKH'lerde, fenoksibenzamin etkisinde adipojenik farklılaşma grubunda α1A-AR'de görüldü (fold change: 4221±1391; p<0,05). FM gruplarında hiçbir adrenerjik reseptör için Kİ gruplarının bazılarındaki gibi yüksek ekspresyon saptanmadı. FM kaynaklı MKH'lerde saptanan en yüksek ekspresyon artışı propranolol etkisinde adipojenik farklılaşma grubunda β1-AR'de görüldü (fold change: 2,97±0,94; p<0,05). Osteojenik farklılaşmış hücrelerde FM ve Kİ gruplarında BMP-6 mRNA ekspresyonları, farklılaşmamış hücrelere göre anlamlı derecede artış gösterdi. Fakat Kİ kaynaklı propranolol ve fenoksibenzamin etkisinde osteojenik faklılaşan hücrelerde, normal osteojenik farklılaşmış gruba göre BMP-6 mRNA ekspresyonlarında anlamlı azalma tespit edildi. Her iki kaynaktan MKH'ler için normal ve blokör etkisinde adipojenik farklılaşma gruplarında PPARγ mRNA ekspresyonlarında anlamlı artış tespit edildi. Bu çalışma ayrı kaynaklardan elde edilen MKH'lerin adrenerjik reseptör ekspresyonlarının ve farklılaşmalarının birbirinden değişik olduğunu göstermektedir. Bu nedenle, farklı kaynaklardan ve pasajlardan elde edilen bu hücrelerin klinikte daha etkili kullanılmaları için, reseptör ve farklılaşma açısından in-vivo çalışmalarla daha çok araştırılmaları gerekmektedir.
Özet (Çeviri)
Mesenchymal stem cells (MSCs) with different origin are used for immune-modulatory and regenerative purposes today. These cells were frequently investigated with regard to adhesion molecules, hematopoietic markers and immunologic markers. Limited number of studies are available showing the presence of adrenergic receptors in MSCs. Sufficient data are not available about receptor expressions during production process and differentiation of these cells. Beside, receptor expressions are not known in MSCs obtained from different sources. In this study, mRNA expressions in α1A, α1B, α2A, α2B, β1, β2, β3 subgroups of adrenergic receptors were shown with RT-qPCR in 1th, 2th, 3th passages where they are frequently used for regenerative and immune-modulatory purposes in MSCs obtained from human placental fetal membrane (FM) and bone marrow (BM). Receptor mRNA expressions were also shown with the same method in osteogenic, adipogenic differentiation of these cells and in differentiation under the effect of blocker. Bone Morphogenetic Protein (BMP-6) mRNA expressions were investigated using RT-qPCR with the aim of detecting the influence of blockers on osteogenic differentiation, Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma (PPARγ) mRNA expressions were investigated using RT-qPCR with the aim of detecting the influence of blockers on adipogenic differentiation. In our study, maximum expression rate compared to control group, 1th passage was detected in MSCs of BM-derived α1A-AR, in adipogenic differentiation group under phenoxybenzamine effect (fold change: 4221±1391; p<0,05). High expression was detected for no adrenergic receptor in FM groups, as in some of BM groups. Maximum expression increase in MSCs of FM-derived was seen in β1-AR in adipogenic differentiation group under propranolol effect (fold change: 2,97±0,94; p<0,05). BMP-6 mRNA expressions showed a significant increase in FM and BM groups in osteogenic differentiated cells compared to undifferentiated cells. However a significant decrease was detected in BMP-6 mRNA expressions in osteogenic differentiated cells of BM-derived under propranolol and phenoxybenzamine effect compared to normal osteogenic differentiated group. A significant increase was detected in PPARγ mRNA expressions in normal adipogenic differentiation groups and adipogenic differentiation groups under blocker effect for MSCs from both sources. This study indicates that MSCs obtained from different sources act dissimilar with regard to adrenergic receptor expressions and differentiation. Therefore it is important to investigate these cells from different sources and from different passages with regard to receptors and differentiation in in-vivo studies in order to use these cells more effectively for clinical purposes.
Benzer Tezler
- İn-vitro ortamda farkli kaynaklardan elde edilen mezenkimal kök hücrelerde muskarinik reseptörlerin gösterilmesi ve reseptör blokajinin farklilaşmaya etkisi
Investigation of muscarinicreceptors in mesenchymal stem cells obatined from different sources in vitro and influence of receptor blockadge on differentiation
ARASH ALIZADEH YEGANI
Doktora
Türkçe
2016
Eczacılık ve FarmakolojiÇukurova ÜniversitesiTıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FAZİLET AKSU
- Kıkırdak doku rejenerasyonunda kitosan doku iskelesi destekli biyoreaktör performansının incelenmesi
Investigation of chitosan scaffold containing bioreactor performances for cartilage tissue regeneration
RAHİME SEDA TIĞLI
Doktora
Türkçe
2009
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU
- Darbeli elektromanyetik alanlar ile osteojenik indüksiyon (teorik, deneysel ve klinik çalışma)
Başlık çevirisi yok
ARSLAN BORA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1982
Ortopedi ve TravmatolojiEge ÜniversitesiOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MERİH EROĞLU
- Akvaryum bitkileri hygrophila difformis ve microsorium pteropus'un ın vitro koşullarda çoğaltımı
In vitro propagation of aquarium plants hygrophila difformis and microsorium pteropus
MERYEM ÖZTÜRK
Doktora
Türkçe
2008
GastroenterolojiAnkara ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEBAHATTİN ÖZCAN
- Kemik doku mühendisliği için polimer-biyoaktif cam içeren enjekte edilebilir kompozit kemik doku destek malzemesi üretimi ve karakterizasyonu
Injectable polymer-bioactive glass composite bone tissue support material production and characterization for bone tissue engineering
ALİ CAN ÖZARSLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEVİL YÜCEL