Hyaluronik asit sentaz geninin Lactococcus lactis'te ekspresyonu
Hyaluronic acid synthase gene expression in Lactococcus lactis
- Tez No: 436617
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. PINAR AYTAR ÇELİK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biyoloji, Biotechnology, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji ve Biyogüvenlik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Hyaluronik asit, tıbbi ve endüstriyel alanlarda yaygın olarak kullanılan ve dünya genelinde önemli bir pazar payına sahip bir biyopolimerdir. Birçok yapısal, fizyolojik ve biyolojik fonksiyona sahip olan bu biyopolimer hemen hemen tüm dokuların fonksiyonel bileşenidir. Hyaluronik asit yüksek su tutma kapasitesi, immünojenik olmaması, yüksek biyouyumluluğu sebebi ile ortopedik uygulamalarda, kozmetik, medikal ve farmasötik gibi çeşitli alanlarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Hyaluronik asit ticari olarak hayvansal dokular ve patojenik Streptococcus cinsi bakteriler olmak üzere iki temel kaynaktan elde edilmektedir. Ancak bu kaynaklardan elde edilen hyaluronik asitin çeşitli kontaminasyon riskleri içermesi ve alerjik reaksiyonlar meydana getirmesi nedeniyle alternatif kaynakların geliştirilmesi önem kazanmıştır. Bu çalışmada hyaluronik asit üreten alternatif rekombinant bir suş oluşturulması hedeflenmiştir. Patojenik Streptococcus equi subsp. zooepidemicus suşundan elde edilen hyaluronik asitin kontaminasyon riskinden kaçınmak için bu suşun hyaluronan sentaz enzimini kodlayan hasA geni, bir laktik asit bakterisi olan Lactococcus lactis'e aktarılmıştır ve Lactococcus lactis'in hyaluronik asit üreten rekombinant L. lactis CES15 olarak adlandırdığımız suş oluşturulmuştur. Bu kapsamda öncelikle Streptococcus equi subsp. zooepidemicus'un hasA geninin 5' ve 3' ucuna spesifik primerler kullanılarak amplifikasyonu gerçekleştirilmiştir. Amplifiye edilen gen bölgesi nisin kontrollü promotor sistemine sahip bir plazmid vektör olan pNZ8150'ye aktarılmıştır. Rekombinant Lactococcus lactis CES15 suşu nisin ile indüklenerek hyaluronan sentaz geninin ekspresyonu kontrol edilmiştir ve hyaluronik asit üretim yeteneği araştırılmıştır. Çalışmada 7,5 ng/ml nisin ile indüklenen rekombinant Lactococcus lactis CES15'in 3 saatlik indüksiyondan sonra, 2,9746 mg/ml gibi yüksek bir miktarla hyaluronik asit ürettiği belirlenmiştir. Bu yüksek sonuca sadece tek bir genin klonlanması ile ulaşılmıştır ve 3 saat indükleme süresi literatüre kıyasla oldukça kısadır.
Özet (Çeviri)
Hyaluronic acid that widely used in medical and industrial area and has a significant market share worldwide is a biopolymer. This biopolymer having many structural, physiological and biological functions is functional components of virtually all tissues. Hyaluronic acid because of high water holding capacity, lack immunogenic, the high biocompatibility characteristics, are widely used in various fieldssuch as in cosmetics, medical and pharmaceutical and orthopedic applications. Hyaluronic acid is commercially obtained from two main sources as animal tissues and pathogenic bacteria, Streptococcus genus. Alternative sources of production are also important because of hyaluronic acid which obtained from these sources including various risks of contamination and giving allergic reactions. In this study, it was targeted the creation of an alternative strain recombinant producinghyaluronic acid. To avoid the risk of contamination of hyaluronic acid enzyme encoding gene, hyaluronan synthase obtained from strain ofpathogenic Streptococcus equi subsp. zooepidemicushas been transferred with a lactic acid bacterium Lactococcus lactis and recombinant Lactococcus lactis strain CES15 strain was formed from Lactococcus lactis producing hyaluronic acid. In this context, the hasA gene 5 'and 3' end amplification of Streptococcus equi subsp. zooepidemicus was performed using specific primers. The amplified gene in a plasmid vector with a nisin-controlled promoter systems pNZ8150 has been transferred. The expression of hyaluronan synthase gene was controlled by induced recombinant strains of Lactococcus lactis nisin CES 15 and hyaluronic acid production capability was investigated. In this study, recombinant Lactococcuslactis CES15 with induced 7.5 ng/ml nisin was determined producing hyaluronic acid as 2.9746 mg/ml.
Benzer Tezler
- Symphytum offıcınale l. süspansiyon hücre kültürü ekstraktının insan fibroblast hücrelerinde (CRL-2076) yaşlanma karşıtı genlerin ekspresyonlarına etkisinin belirlenmesi
Symphytum officinale l. suspension cell culture extract on expression of anti-aging related genes on human fibroblast cells (CRL-2076)
AYŞENUR ÇALLI
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyoteknolojiYıldız Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ŞENAY VURAL KORKUT
- Lactococcus lactis'ten rekombinant hyaluronik asit üretimi
Recombinant hyaluronic acid production from Lactococcus lactis
RAMAZAN DEMİRHAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
MikrobiyolojiYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CEM BÜLENT ÜSTÜNDAĞ
- Pankreatik adenokarsinom hastalarına özgü kolajen/hiyalüronik asit/fibronektin temelli filmlerin sentez ve karakterizasyonu
Fabrication and characterization of collagen/hyaluronic acid/fibronectin-based films specific to pancreatic adenocarcinoma patients
ELİF AYŞE KAÇAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyomühendislikSağlık Bilimleri ÜniversitesiDoku Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEVDE ALTUNTAŞ
- Biyobozunur bakteriyel selüloz-hyalüronik asit doku iskelelerinin çıt-çıt reaksiyonları ile sentezi ve uygulamaları
Synthesis of biodegradable bacterial cellulose-hyaluronic acid tissue scaffolds via click reactions and their applications
ŞEYMA TURAN OKULMUŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Polimer Bilim ve TeknolojisiMarmara ÜniversitesiPolimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NİLHAN KAYAMAN APOHAN
PROF. DR. DİLEK KAZAN
- Kronik hepatit B'li hastaların tedavisinde serum hyaluronik asit ve prolidaz ölçümlerinin fibrotik aktivite takibinde tanı değerinin araştırılması
The diagnostic value of hyaluronic acid and prolidase in monitoring the response to interferon alpha treatment in chronic hepatits B patients
HANDAN İLHAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2005
Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik MikrobiyolojiGataEnfeksiyon Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞABAN ÇAVUŞLU