Geri Dön

Polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve bazı bileşiklerin bu enzim üzerindeki etkilerinin araştırılması

Purification of polyphenol oxi̇dase enzyme and investigation effects of some compounds on the enzyme

PDF İndir

  1. Tez No: 432810
  2. Yazar: ADEM ERGÜN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. OKTAY ARSLAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Kimya, Biyokimya, Chemistry, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Afinite kromatografisi, Polifenol oksidaz, İnhibisyon, Affinity chromatography, Polyphenol oxidase, Inhibition
  7. Yıl: 2016
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Balıkesir Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Polifenol oksidaz enzimi, Sepharose 4B-L-tirozin-p-amino benzoik asit afinite kromotagrafisi jeli kullanılıp Musa sapientum var. Cavendishii (Muz) meyvesinden saflaştırılmıştır. Saflaştırdığımız enzimin aktivitesi üzerinde 44 adet orijinal Flavonoid türevlerinin etkileri araşırılmıştır. 44 maddenin tamamı PPO enzimini inhibe etmiştir. En güçlü inhibitör özelliğini 7-O-sellebiyozil apigenidin ([IC50]=10.7 M, Ki=7.45 M ) bileşiği göstermiştir. Ayrıca, PPO enziminin saflaştırılması için kullanilan Sepharose 4B-L-tirozin-p-amino benzoik asit afinite kromotagrafisi jeline ilaveten iki yeni afinite kromatografisi jeli sentezlenmiştir. Bu jeller, CNBr ile aktive edilen Sepharose-6B ve Sepharose-4B'ye uzantı kolu olarak anilin bağlandıktan sonra p-aminobenzoik asitin aniline kenetlenmesi sonucu elde edilmiştir. Her iki jellede aynı enzim kaynağı kullanılarak PPO enzimi saflaştırılmıştır. Sepharose-4B ve Sepharose-6B içeren jeller kullanılarak sırasıyla, %7.05 - %4.49 verim ve 105.042 - 33.4 saflaştırma derecesine ulaşılmıştır. Enzimin saflığı ve molekül ağırlığı, SDS-PAGE ile kontrol edilmiştir. Daha sonra 4 adet pestisitin, PPO enzim aktivitesi üzerindeki etkileri araştırılmış ve söz konusu enzimi inhibe ettikleri tespit edilmiştir. Aralarında en güçlü inhibitörün Glifosfat izopropil amin ([IC50]=33.5 mM, Ki=20.7 mM) olduğu saptanmıştır.

Özet (Çeviri)

Polyphenol oxidase enzyme was purified from Musa sapientum var. Cavendishii (banana) by using Sepharose 4B-L-tyrosine-p-amino benzoic acid affinity gel. In this study, 44 original flavonoide derivatives used to investigate their effects on the pure enzyme activity. All of the 44 compounds inhibited the PPO enzyme activity. The most powerful inhibitor is 7-O-cellobiosile apigenidine ([IC50]=10.7 M, Ki=7.45 M ). In addition to Sepharose 4B-L-tyrosine-p-amino benzoic acid affinity gel, two novel affinity chromatography gels were synthesized for purifing PPO enzyme. The affinity chromatography gels were synthesized by coupling aniline as a spacer arm to CNBr activated Sepharose-4B and Sepharose-6B. Then, p-amino benzoic acid was coupled to aniline as a ligand. PPO was purified from the same enzyme source by using the gels. 7.05 % –4.49 % yield and 105.042 – 33.4 fold purification were achieved from the gel contain Sepharose-4B and Sepharose-6B, respectively. Purity and molecular weight of the enzyme were controlled with SDS-PAGE. Then, four pesticides' effects on the pure enzyme activity were investigated. The results showed that all of the pesticides inhibited the enzyme activity. Among the four pesticides that tested, Glyphosate isopropylamine was found to be the most powerful inhibitor with [IC50]=33.5 mM, Ki=20.7 mM.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    251048

    Partial purification and characterization of polyphenol oxidase from Thermophilic bacillus Sp.

    Polifenol oksidaz enziminin Termofilik bacillus Sp.? den kısmi olarak saflaştırılması ve karakterizasyonu

    MELDA ZEYNEP GÜRAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2009

    Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Biyoteknoloji Bölümü

    YRD. DOÇ. DR. GÜLŞAH ŞANLI

    YRD. DOÇ. DR. ÇAĞLAR KARAKAYA

  2. Tez No

    131625

    Pyrus elaegrifolia meyvesinden polifenol oksidaz enziminin afinite kromatografisi ile saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin incelenmesi

    Purification of polyphenol oxidase from Pyrus elaegrifolia fruit by affinity chromatography and characterization of its some kinetic properites

    FATMA ÜLKER YERLİTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    KimyaBalıkesir Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OKTAY ARSLAN

  3. Tez No

    432271

    Muz polifenol oksidaz enziminin immobilizasyonu ve bazı özelliklerinin incelenmesi

    Immobilization of banana polyphenol oxidase enzyme and investigation of the some properties

    ŞEYMA ERİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    KimyaBalıkesir Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAHİT GENÇER

  4. Tez No

    483665

    Tortum elmasından (Malus sylvestris.) polifenol oksidaz enziminin afinite kromatografisi ile saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı kimyasalların enzim aktivitesi üzerine etkisinin incelenmesi

    Purification of polyphenol oxidase enzym from tortum apple (Malus sylvestris.) by affinity chromatography, characterization and investigate the effect of some chemicals on the enzym activity

    ŞAHİN KARABULUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU

  5. Tez No

    742477

    Polifenol oksidaz enziminin miskali üzümünden (Vitis Vinifera L.) saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı gıda katkı maddelerinin enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin araştırılması

    Purification and characterization of polyphenol oxidase enzyme from mi̇skali̇ grape (Vitis Vinifera L.) and investigation of some food additives' inhibition effects on enzyme activity

    FUNDA BEDER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyomühendislikIğdır Üniversitesi

    Biyomühendislik ve Bilimleri Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    DR. ÖĞR. ÜYESİ UĞUR GÜLLER

Geri Dön