Hipoksi ortamının hiyalüronan ekspresyonuna etkisinin in vitro koşullarda araştırılması
The investigation of the effects of hypoxia on hyaluronan expression in vitro conditions
- Tez No: 420080
- Danışmanlar: DOÇ. DR. METİN AYTEKİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Hiyalüronan, Hipoksi, Hipoksi İle İndüklenen Faktör 1-Alfa (HIF-1α), Memeli Rapamisin Hedefi (mTOR), HIF, HIF-1a, Hyalüronik asit, Rapamisin, Hyaluronan, Hypoxia, Hypoxia Inducible Factor 1-Alpha (HIF-1α), Mammalian Target of Rapamycin (mTOR), HIF, HIF-1a, Hyaluronic acid, Rapamycine
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erciyes Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
HİPOKSİ ORTAMININ HİYALÜRONAN EKSPRESYONUNA ETKİSİNİN İN VİTRO KOŞULLARDA ARAŞTIRILMASI Muazzez DERYA ANDEDEN Erciyes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı Yüksek Lisans Tezi, Ocak 2016 Danışman: Doç. Dr. Metin AYTEKİN ÖZET Hiyalüronan, bağ dokuyu bir arada tutma, hücre davranışını düzenleme, yara iyileşme süreci ve inflamasyon gibi bir çok hücresel olayda yer alan bir ekstraselüler matriks bileşenidir. Spesifik hücre yüzey reseptörlerine bağlanarak pek çok sinyal yolağının transdüksiyonunu indükler. Hiyalüronan üretimi farklı büyüme faktörlerinden doza bağlı bir şekilde etkilenir ancak hipoksi gibi stres faktörlerinin bu üretim üzerindeki etkisi hakkında literatürde yeterli bilgiye rastlanmamıştır. Bu tez çalışmasında, ilk olarak elimizde var olan hücre hatlarından hiyalüronan üretimi yapan hücre hattı seçildi. Bu hücre hattı için hipoksi ortamı oluşturuldu. Hipoksi koşulunun ve bir transkripsiyon faktörü olan ve hipokside aktif hale geçen hipoksi ile indüklenen faktör 1-alfa (HIF-1α)'nın hiyalüronan üretimi üzerindeki etkisini araştırmak için ELİSA yöntemi ile hücrelerden salgılanan hiyalüronan miktarı belirlendi. MDA-MB-231 hücre hatları tezimiz için seçildi (24 saat inkübasyon için süpernatanttaki hiyalüronan miktarı (ng/ml, ortalama±SS): MDA-MB-231 25.17±2.06, kontrol 8.42±0.54; p<0.00001). Normoksi ve hipoksi ortamlarında HIF-1α'nın hiyalüronan sentezine MDA-MB-231 hücre hatları üzerine etkisi araştırıldı. Hipoksi ortamda HIF-1α'nın arttığı ve orantılı olarak hiyalüronan sentezinin de arttığı ve HIF-1α'yı Px478 inhibitörü ile baskılandığımızda hiyalüronan sentezinin de baskılandığı belirlendi (süpernatanttaki hiyalüronan miktarı (ng/ml, ortalama±SS): MDA-MB-231 (Hipoksi) 60.00±0.7, MDA-MB-231 (Hipoksi+Px478) 45.00±0.5; p<0.05). Hipoksi koşulunda hücrelerde hiyalüronan seviyesindeki değişikliğin mTOR ile ilişkili olduğu belirlendi (süpernatanttaki hiyalüronan miktarı (ng/ml, ortalama±SS): Rapamisin (-) 25.2±0.54, Rapamisin (+) 10.02±0.87; p<0.05] ve hipoksi koşullarda [süpernatanttaki hiyalüronan miktarı (ng/ml, ortalama±SS): Rapamisin (-) 58.0±2.2, Rapamisin (+) 40.02±2.0; p<0.05). Tüm sonuçlar değerlendirildiğinde, hipoksi koşulunda normoksi koşuluna göre hiyalüronan üretiminin anlamlı derecede arttığı ve HIF-1α'nın bu artışı inhibe ettiği tespit edildi. Bununla birlikte mTOR baskılanmasının da hiyalüronan sentezini negatif yönde etkilediği belirlendi. mTOR, HIF-1α ve hiyalüronan molekülleri arasında muhtemel mekanistik bir ilişkinin olduğu sonucuna varıldı.
Özet (Çeviri)
THE INVESTIGATION OF THE EFFECTS OF HYPOXIA ON HYALURONAN EXPRESSION IN VITRO CONDITIONS Muazzez DERYA ANDEDEN Erciyes University, Graduate School of Health Sciences Department of Medical Biology M.Sc. Thesis, January 2016 Supervisor: Assoc. Prof. Dr. Metin AYTEKİN ABSTRACT Hyaluronan is one of the most important components of the extracellular matrix and has been reported to be involved in regulation of cell behavior, wound healing process and inflammation. It induces a variety of cellular signal transduction binding to specific cell surface receptors. Hyaluronan production is affected from different growth factors in dose-dependent manner. However, little is known about the effect of cellular stress conditions such as hypoxia on hyaluronan production. In this study, hyaluronan-expressing cell lines were selected first and then cell culture studies were started ensuring suitable growth conditions for this cell line. MDA-MB-231 cell line was selected for further studies (hyaluronan in supernatant at 24 hour: (ng/ml, mean±SD): MDA-MB-231 25.17±2.06, control 8.42±0.54; p<0.00001). The hypoxia condition was provided using cobalt chloride and hyaluronan secreted from cells was measured by ELISA analysis to determine the effect of hypoxia and hypoxia inducible factor-1 alpha on hyaluronan production. HIF-1α and hyaluronan increased in hypoxia conditions, while hyaluronan synthesis was supressed when we inhibit HIF-1α with PX-478 (hyaluronan in supernatant (ng/ml, mean±SD): MDA-MB-231 (Hypoxia) 60.00±0.7, MDA-MB-231 (Hypoxia+Px478) 45.00±0.5; p<0.05). A relation was determined between mTOR and changes in hyaluronan levels in hypoxia (hyaluronan in supernatant (ng/ml, mean±SD): Rapamycin (-) 25.2±0.54, Rapamycin (+) 10.02±0.87; p<0.05] and in hypoxia [supernatant hyaluronan (ng/ml, mean±SD): Rapamycin (-) 58.0±2.2, Rapamycin (+) 40.02±2.0; p<0.05). In summary, it is reported that hyaluronan production is significantly increased in hypoxia compared to normoxia and HIF-1α inhibits this production. On the other hand, inhibition of mTOR negatively affects hyaluronan synthesis.This relationship between these three molecules provides an understanding of the molecular mechanism of hyaluronan and will contribute to the literature.
Benzer Tezler
- Preeklamptik gebeliklerde plasenta ve kandan elde edilen mezenkimal kök hücrelerde transkriptom analizi
Transcriptome analysis on mesenchymal stem cells derived from placenta and blood in preeclamptic pregnancies
ZEYNEP KUMRAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Genetikİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUBA GÜNEL
- Sıçanlarda otolog yağ grefti transferinde hiperbarik oksijen tedavisinin, yağ grefti sağkalımına etkisi
The effect of hyperbaric oxygen therapy on the survival of autologous fat graft transfer of the rats
FETHİ SARPER METE
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahiİstanbul ÜniversitesiPlastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SAMET VASFİ KUVAT
- Düşük basınç ortamının oksidan/antioksidan mekanizmalara, serum çinko(Zn) ve bakır (Cu) düzeyleri üzerine etkilerinin incelenmesi
Effects of chronic hypoxic hypoxia on oxidant/antioxidant status, serum zinc (Zn) and copper (Cu) concentrations
ALİ RIZA KIZILER
- Investigation of redox-dependent benthic nutrient and metal feedbacks under anoxia using early diagenetic modeling
Anoksik koşullarda redoksa bağlı bentik besin ve metal döngülerinin erken diyajenez modellemesi ile incelenmesi
KADİR BİÇE
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Deniz BilimleriOrta Doğu Teknik ÜniversitesiYer Sistem Bilimi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA YÜCEL
PROF. DR. AYŞEN YILMAZ
- Kültür ortamında büyütülen ve hipoksi oluşturulan embriyolar üzerine b12 vitamininin ın vıtro etkisi
It is grown in culture media and hypoxia on embryos created in vitro effects of vitamin b12
DİLARA PATAT