Sodyum arseniğin tm3 leydig steroidogenezinde rol oynayan bazı genlerin ifade düzeyine etkisi
Effect of sodium arsenic on some steroidogenic genes expression profile of tm3 leydig cell
- Tez No: 411486
- Danışmanlar: PROF. DR. MELİKE BELKIZ ERKAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Moleküler biyoloji, Molecular biology
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Zooloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Arsenik mutajenik, teratojenik ve karsinojenik etkileri olan geniş yayılımlı çevresel bir kontaminanttır. Arsenik çevreye; (i) tarımsal, (ii) endrüstriyel ve (iii) medikal uygulamalar aracılığı ile yayılır. Ancak içme suyu genel populasyon için en yaygın maruziyet kaynağıdır ve bu durum ciddi bir çevre problemidir. Arsenik toksisitesini esas olarak, redoks sinyal ve kontrol yolaklarındaki proteinlerin thiol gruplarıyla etkileşime girerek oksidatif hasar üzerinden gösterir. Serbest oksijen radikalleri büyük miktarlarda üretildiği zaman, lipidler ve proteinler gibi hücre içi yapılara oksidatif hasar vererek, hücre içindeki normal mekanizmaları baskılayıp nötralize edebilir ve bu durumda hücresel yapı ve fonksiyonları bozabilir. Arsenikle ilgili bilimsel araştırmaların artmasının sebebleri arasında, arseniğin endüstriyel kullanımı ve bunun sonucunda açığa çıkan maruziyet, hastalıklar için klinik uygulamaları ve arseniğin kimyasal silah olarak kullanımıdır. Mevcut litaretürdeki çalışmaların birçoğu arseniğin erkek üreme sisteminde testis, prostat bezi, epididimis gibi birçok organın ağırlığını azalttığını göstermektedir. Ancak arseniği testiste bulunan Leydig hücresindeki steroidogenez üzerine etkisinin moleküler mekanizması henüz açıklığa kavuşturulmamıştır. Mevcut çalışmamızdaki amacımız sodyum arseniğin TM3 Leydig hücreleri üzerindeki canlılık etkisini MTT yöntemiyle, steroidogenez yolağındaki genlerin ifadesinin değişiminide RT-PCR yöntemi ile açıklık getirmektir. Yapılan çalışmamızda TM3 hücrelerine LH uyarımı ile birlikte 24 saat boyunca sodyum arsenik (50 ppb ve 1000 ppb) uygulamış, doza bağımlı olarak hücre canlılığının düştüğü tespit edilmiştir. Maruziyete bırakılmış hücrelerden elde edilen totalRNA üzerinde yapılan RT-PCR çalışmasında ise CYP11A1 ve CYP17A1 genlerinin ifadesi düşük dozda azalmışken (p< 0.05), yüksek dozda CYP17A1 geninin ifadesi azalmıştır (p< 0.05). Kontrole göre StAR geninin ifadesi düşük dozda (p<0.01) ve yüksek dozda (p< 0.05) arttığı gözlenmiştir.17β-HSD ve 3β-HSD genlerinin ifadesinde düşük dozda azalma görülmüş ancak istatistiksel olarak anlamlılık saptanmamış bununla beraber yüksek dozda her iki genin ifadesinde anlamlı azalma tespit edilmiştir (p< 0.05). İfadesi ölçülen transkripsiyon faktörlerinden steroidogenik faktör 1 (SF-1) düşük dozda (p< 0.05) ve yüksek dozda (p<0.01) anlamlı olarak düşüş göstermiştir. . Yapılan deneyler sonucunda sodyum arseniğin hücre canlılığını düşürdüğü ve steroidogenez yolağında görev alan genlerin ifadesini düşürdüğü tespit edilmiştir. Bu durumun erkek üreme sitemindeki arsenik bozuklukların ve kısırılığın muhtemel sepeblerinden biri olabileceği düşünülmektedir. Temmuz, 2015, 52 Sayfa
Özet (Çeviri)
Arsenic is a widespread environmental contaminant with mutagenic, teratogenic, and carcinogenic effects. Arsenic is released into the environment via agricultural and industrial processes as well as from medical applications. However, drinking water is the most common source of arsenic exposure for the general population and is often considered as a serious environmental problem. Arsenic is mainly interact with protein thiols which are essential component of redox-sensitive proteins in redox signaling and control pathways. Free oxygen radicals when produced in large quantities compressing their neutralizing mechanism in normal cells and disrupt cellular structure and function in this case oxidative damage intracellular structures such as proteins and lipids. The primary stimuli for arsenical research has come from the long history of arsenic as a homicidal poison, the industrial use of arsenicals, the clinical application of the arsenicals in protozoal and neoplastic diseases and the use of arsenicals in chemical warfare. Many of the studies in the existing literature regarding effects of arsenic on the male reproductive system appear to reduce the weight of many organs such as the testis, prostate gland, and epididymis. However, the molecular mechanism of the effect of arsenic on steroidogenesis in the Leydig cells have not yet been clarified. Our studies have applied for 24 hours with sodium arsenic (50 ppb and 1000 ppb) to LH stimulatied TM3 cells, it has been found to dose-dependent decreased cell viability. The LH-stimulated TM3 Leydig cells were treated with two concentrations of sodium arsenic (50 ppb and 1000 ppb) for 24 hours. MTT results showed that the cell viability of Leydig cells exposed to sodium arsenic significantly decreased in both 50 and 1000 ppb concentrations. (p<0.0001, p<0.05) RT-PCR studies on total RNA obtained from the exposed cells revealed that CYP11A1 and CYP17A1 gene expressions decrased both in high doses ( p<0.05). The StAR gene expression compared to control was observed to incrase the low dose (p<0.01) and high dose (p< 0.05). HSD3B and HSD17B gene expression was observed in the low dose reduction but not considered statistically significant, however the expression of both genes was decreased significantly in high doses ( p<0.05). The measured the expression of transcription factor SF-1 (steroidogenic factor 1) decreased significantly both in the low dose ( p< 0.05) and high dose (p<0.01). Our findings showed that sodium arsenic significantly reduced cell viability and disrupt the normal expression of genes involved in steroidogenesis: It has been suggested that it can lead to infertility and the male reproductive tract disorders.
Benzer Tezler
- Sıçanlarda arseniğin sebep olduğu testiküler hasara karşı kuersetinin koruyucu etkileri
Protective effects of quercetin against arsenic induced testicular damage in rats
BİLAL BURAK BALTACI
- Ratlarda arseniğin oluşturduğu karaciğer hasarına karşı krisinin etkisi
The effect of chrysin against liver damage caused by arsenic in rats
MİKAİL SUNGUR
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Veteriner HekimliğiErciyes ÜniversitesiVeterinerlik Farmakoloji ve Toksikolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖKHAN ERASLAN
- Demir oksitler ile içme sularından arsenik giderimi
Arsenic removal from drinking water by iron oxide
MEHMET EFE ÇAKIROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Metalurji Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiMetalurji ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERVET TİMUR
- Arsenik toksisitesinde serbest radikaller ve antidot çalışmaları
Free radicals in arsenic toxicity and antidote treatments
AYBİKE DİP
Yüksek Lisans
Türkçe
2001
Adli TıpAnkara ÜniversitesiAdli Toksikoloji ve Adli Kimya Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. ŞAHAN SAYGI
- Arsenikli kolemanit cevherinden boraks üretimi
The Production of borax from colemanite ore with arsenic
AHMET SAKARYA