Investigation of the fructose uptake system in halomonas smyrnensis AAD6 to design strategies for enhanced levan biosynthesis
Artırılmış levan bi̇yosentezi̇ strateji̇leri̇ tasarlamak i̇çi̇n halomonas smyrnensis AAD6'daki fruktoz alımının araştırılması
- Tez No: 390686
- Danışmanlar: DOÇ. DR. KAZIM YALÇIN ARĞA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biyomühendislik, Genetik, Biotechnology, Bioengineering, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Halofilik bakteriler, Halophilic bacteria
- Yıl: 2014
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Mikrobiyal biyopolimerler gösterdikleri farklı fizikokimyasal ve reolojik özellikleri ile yeni dönem biyomateryaller olarak kabul edilmektedirler. Bu polimerler biyobozunurluk ve biyouyumluluk özellikleri sayesinde çevre ve insan dostu bileşiklerdir, bu nedenle mikrobiyal biyopolimerler tekstil, deterjan, yapıştırıcı madde, atık su arıtımı, mayalama, kozmetoloji, ilaç bilimi ve gıda katkı maddeleri gibi geniş endüstriyel uygulama alanlarına sahiptirler. Halomonas smyrnensis AAD6T gram-negatif, aerobik, ekzopolisakkarit üreten ve orta derecede halofilik bir bakteridir. Bu bakteri yüksek miktarda levan biyopolimeri üretmektedir. Levan, suda ve yağda iyi çözünebilirliği, güçlü adezivite, biyouyumluluk ve filmleşme özellikleri nedeniyle gıda, besicilik, kozmetik, ilaç ve kimya sanayisinde birçok potansiyel kullanım alanına sahip bir fruktoz homopolimeridir. Son yıllarda Halomonas smyrnensis AAD6T 'nin metabolik ağ yapı modeli tüm genom sekansı baz alınarak oluşturulmuş ve polimer sentezini artıracak stratejiler araştırıldığında levan üretiminin artırılmasının organizmadaki fruktoz alımı sistemine bağlı olduğu gösterilmiştir. Bu sonuçlara dayanarak fruktoz spesifik fosfotranferaz sisteminin bütün bileşenleri in silico analizlerle belirlenmiştir. Bileşenlerin belirlenmesi bir metabolizma mühendisliği stratejisi kurulmasını ve transposonların kullanılacağı bir mutasyonun gerçekleştirilmesini sağlamıştır. Fruktoz alım sisteminin önemli parçalarından biri olan HPr bileşeninin, fruktozun hücre içine alımını engellemek için organizma genomundan omega interpozunu ile mutasyonu sağlanmıştır. Mutasyonun başarılı olması Halomonas smyrnensis AAD6T 'de fruktozun hücre içine alınamayıp yalnızca levan polimeri sentezinde kullanılmasını sağlamış ve levan üretimi %40'lık bir verimle artırılmıştır. Buna ek olarak bu mutasyon Halomonas smyrnensis BMA14 olarak isimlendirilen yeni bir suşu oluşturmuştur. Son olarak, bu çalışmanın çıktıları halofilik bakteriler tarafından sentezlenen diğer polimerlerin üretimini artırmak için sistem biyolojisi yaklaşımı ve metabolizma mühendisliği stratejilerinin tasarlanmasını içeren çalışmaları hızlandıracaktır.
Özet (Çeviri)
Microbial biopolymers are accepted as new biomaterials due to their different physicochemical and rheological characteristics with novel functionality. Biopolymers are more biocompatible, biodegradable, and both environmental and human friendly compounds. There are wide range of applications of microbial exopolysaccharides in many industrial sectors like textiles, detergents, adhesives, wastewater treatment, brewing, cosmetology, pharmacology, and food additives. Halomonas smyrnensis AAD6T is a gram-negative, aerobic, exopolysaccharide-producing, and moderately halophilic bacterium that produces levan, a fructose homopolymer with many potential uses in various industries like foods, feeds, cosmetics, pharmaceutical and chemical industries. Levan has outstanding properties like high solubility in oil and water, strong adhesivity, good biocompatibility and film-forming ability. Based on the whole genome sequence of Halomonas smyrnensis AAD6T, a metabolic network of the microorganism was reconstructed and strategies were designed to enhance levan biosynthesis recently. Enhancement strategies for the biosynthesis of levan biopolymer by Halomonas smyrnensis AAD6T basically depends on the fructose uptake system of the organism. Therefore, in the present study, the fructose specific phosphotransferase system (PTSfru) of H. smyrnensis AAD6T was investigated via in silico analysis. Investigation of all components of this system provided to construct a metabolic enginnering strategy which hinges basically on mutagenesis with using transposons. Fructose specific phoshocarrier protein- HPr is one of the most important component of PTSfru system was mutated in the bacteial genome in order to prevent uptake of fructose into the cell. Achievement of the mutagenesis on genome of Halomonas smyrnensis AAD6T contributed to utilize fructose monomers only in biopolymer production which resulted in elevated production of the polymer with 40% efficiency. Also, a new strain of Halomonas smyrnensis was constructed which has been named as Halomonas smyrnensis BMA14. Outcomes of this study will accelerate the research on enhanced production of any other biopolymers from halophilic bacteria towards systems biology approaches and design of metabolic engineering strategies.
Benzer Tezler
- Vitreoscilla hemoglobin eksprasyonu yapan rekombinant Erwinia herbicola'da ikincil metabolit akış dağılımı
Secondary metabolite flux distribution in Erwinia herbicola expressing Vitreoscilla hemoglobin
ASLI GİRAY KURT
Doktora
Türkçe
2012
Biyolojiİnönü ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BURHAN ATEŞ
PROF. DR. HİKMET GEÇKİL
- Karın ağrısı ile giden fonksiyonel gastrointestinal hastalıklarda laktoz ve fruktoz intolerans sıklıkğının araştırılması
Investigation of the prevalence of lactose and fructose intolerance in functional gastrointestinal diseases accompained with abdominal pain
ÖZLEM YÜCE
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2014
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıOndokuz Mayıs ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYHAN GAZİ KALAYCI
- Yetişkin bireylerde farklı miktarlarda fruktoz tüketiminin antropometrik ölçümler ve bazı biyokimyasal parametreler üzerine etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of different amounts fructose consumption on anthropometric measurements and some biochemical parameters in adults
EDA KESKİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Beslenme ve Diyetetikİstanbul Medipol ÜniversitesiBeslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ HAVVANUR YOLDAŞ İLKTAÇ
- Yüksek fruktozun oluşturduğu metabolik sendromda L. plantarum ve L. helveticus'un böbrek fonksiyonları ile oksidan ve antioksidan parametreler üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of L. plantarum and L. helveticus on kidney functions and oxidant and antioxidant parameters in fructose-induced metabolic syndrome
ÖMER ADİL KORKMAZ
Doktora
Türkçe
2019
BiyokimyaYıldız Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BARBAROS NALBANTOĞLU
PROF. DR. FATMA AKAR
- Diyet içinde fruktoz verilmesinin sıçanlarda böbrek fonksiyon belirteçleri, glukoz taşıyıcıları, insülin ve inflamasyon yolakları üzerine etkisinin incelenmesi
Investigation of the effects dietary fructose on renal function markers, glucose transporters, insulin and inflammation pathways in kidney of rats
ELİF BİLİM
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Endokrinoloji ve Metabolizma HastalıklarıGazi ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATMA AKAR