Geri Dön

Ex Vivo granülositer koloni oluşturan insan göbek kordon kanı hücrelerinin kök hücre fenotip analizi

Phenotypical analysis of Ex Vivo granulocyte colony forming human umblical cord blood cells

PDF İndir

  1. Tez No: 382404
  2. Yazar: EMİNE BEGÜM GENÇER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MERAL BEKSAÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Tıbbi Biyoloji, Biology, Biotechnology, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Üniversitesi
  10. Enstitü: Biyoteknoloji Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

İnsan göbek kordon kanı (KK) kaynaklı Hematopoietik kök hücre (HKH)'lerin klinik uygulama için yeterli niteliklere sahip olup olmadığını gösteren standart yöntemler mevcuttur. Akım sitometri yöntemi ile CD34+ hücre mutlak sayısı KK ünitesi seçimindeki HLA uyumundan sonraki seçim kriteridir. Fenotipik bir belirleyici olan CD34+ hücre sayısı kadar, bu hücre fraksiyonların ve işlevselliğinin ortaya konması, uzun dönem ve kısa dönem hücreleri tanımlamak için de kullanılmaktadır. Kök hücre dondurarak saklama sırasında ve eriterek çözme sonrası HKH kalite ve sayısının belirlenmesi de önemli bir gereksinimdir. KK HKH içeriğini belirlemeye yönelik işlevsel bir yöntem olan ex vivo koloni oluşturma (CFU-GM) testleri bu gereksinimleri karşılamaya yönelik olarak geliştirilmiştir. Hücre fraksiyonlarının işlevsel niteliklerini hızlı bir şekilde belirlemek için aldehit dehidrogenaz (ALDH) aktivite tayini yöntemi geliştirilmiştir. Bu tez çalışması ile KK hücrelerinde toplanmayı takiben kabul kriterlerini sağlayan taze örneklerde ve dondurup çözülme sonrası örneklerde çalışılan CFU-GM kapasitesi, akım sitometrik CD34+ ve ALDH aktivitesi arasındaki ilişkinin analizi hedeflenmiştir. Araştırmaya 35 KK örneği dahil edilmiş, tüm örneklerde bu üç parametre analiz edilmiştir. Örneklerin 30'u eritrosit ve plazma ayrıştırma işlemi sonrası; 5'i araştırmaya ayrılmış -196°C'de saklanma sonrası çözüldükten sonra çalışmaya dahil edilmiştir. Taze örneklerin ortalama hücre içeriği toplam çekirdekli hücre (TNC) (93,27 ± 30,1 x106/Ünite), CD34+ hücre (3,85 ± 2,55 x106/Ünite), ALDH pozitif (ALDH+) hücre (3,14 ± 2,55 x106/Ünite), CFU-GM sayısı (13,2 ± 9,81 x105/Ünite), CFU-GEMM sayısı (19,3 ± 13,65 x105/Ünite) ve dondurulup çözülmüş örneklerde, TNC (71,76 ± 29,77 x106/Ünite), CD34+ hücre (5,44 ± 5,08 x106/Ünite), ALDH+ hücre (2,9 ± 2,82 x106/Ünite) ,CFU-GM sayısı (6,18 ± 3,44 x106/Ünite) ve CFU-GEMM sayısı (4,57 ± 3,22 x106/Ünite) aktiveteleri analiz edilmiştir. Taze örneklerde CD34 ile CFU-GM (r=0,722 p<0,001) ve CFU-GEMM (r=0,723 p<0,001) arası ilişki ; ALDH ,CFU GM (r=0,624 p<0,001), CFU-GEMM (r=0,451 p=0,12) ve CD34 ile ALDH (r=0,670 p<0,01) arası ilişki istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

There are presently a few methods available in the scientific literature to determine sufficiency and qualification of the hematopoietic stem cells (HSC)'s extracted from human umbilical cord blood (UCB) to use in the clinical applications. Flow cytometry procedure to determine the absolute number of CD34+ cells is the main CB unit selection criterion after HLA matching. The number of CD34+ cells and subpopulations, is also being used to identify the cell functionality fraction of the evaluation of long term (LTR) and short term repopulating (STR) capacity. In stem cell banking the quality and number of HSC is also an important requirement. In order to determine functionality ex vivo colony forming, UCB HSC unit-glanulocyte macrophage (CFU-GM) tests have been developed as the main method which has strong engraftment prediction potential of the CB unit. One of the recent methods described for the rapid and accurate detection of functional CB cell fractions is ALDH activity measurement in CB cells. In this thesis, CB cells collected according of the following acceptance criteria CFU-GM capacity, flow cytometric enumaration of CD34+ cells and measurement of ALDH positivity has been targeted to analyze the relationship between them. 35 samples of UCB included in this study and analyzed in all the samples for the mentioned three parameters. 30 samples have been studied following erythrocyte and plasma separation; another 5 samples which were cryopreserved at -196 °C and used after thawing. The total number of nucleated cells of fresh samples (TNC) (93,27 ± 30,1 x106/Unit), CD34+ cell counts (3,85 ± 2,55 x106/Unit) ALDH positive (ALDH+) (3,14 ± 2,55 x106/Unit), CFU-GM (13,2 ± 9,81 x105/Unit), CFU-GEMM (19,3 ± 13,65 x105/Unit) and in freeze-thaw samples TNC (71,76 ± 29,77 x106/Unit), CD34+ (5,44 ± 5,08 x106/Unit), ALDH + (2,9 ± 2,82 x106/Unit ) ,CFU-GM (6,18 ± 3,44 x106/Unit) and CFU-GEMM (4,57 ± 3,22 x106/Unit) were analyzed. In fresh samples relationship between CFU-GM, CD34 (r = 0.722, p <0,001) and CFU-GEMM (r = 0,723, p <0,001) ALDH, CFU GM (r = 0,624, p <0,001), and the relation between CFU-GEMM (r = 0,451, p = 0,12) and CD34, ALDH (r = 0,670, p <0,01) were found to be statistically significant.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    192306

    Mobil telefon kullanımına bağlı oluşan 900-1800 mhz radyo frekans dalgalarının meydana getirdiği elektromanyetik alanın iliak kanat kemik mineral yoğunluğuna etkisi

    The effect of electromagnetic fields on bone mineral density of iliac bone produced by 900-1800 mhz radio frequency waves dependent on cellular phone usage

    BEŞİR ANDAÇ AKSOY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    Ortopedi ve TravmatolojiSüleyman Demirel Üniversitesi

    Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. NEVRES HÜRRİYET AYDOĞAN

  2. Tez No

    886255

    Leishmania spp. enfeksiyonlarının makrofaj polarizasyonu üzerine etkilerinin araştırılması

    Role of Leishmania spp. infections in macrophage polarisation

    NEVİN TAYMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    ParazitolojiEge Üniversitesi

    Tıbbi Parazitoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SERAY TÖZ

  3. Tez No

    683036

    Hematopoetik kök hücre gen tedavi kültür koşulları ve engrafman optimizasyonu

    Optimization of hematopoietic stem cell gene therapy culture conditions and engraftment

    MEHMET EMİN ŞEKER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Allerji ve İmmünolojiHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATİMA SUSANNA FAUSTİNA AERTS KAYA

  4. Tez No

    961752

    The investigation of disease associated NOD2 in human eosinophilic cells in the context of viral immunity by in vitro analysis

    Hastalıkla ilişkili NOD2'nin viral bağışıklık bağlamında insan eozinofil hücrelerinde in vitro araştırılması

    EDANUR BARUTÇU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2025

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    PROF. DR. CEREN ÇIRACI MUĞAN

  5. Tez No

    91552

    A vitamininin kızamık hastalarının polimorf nüveli lökosit fonksiyonları üzerine etkisinin ex vivo araştırılması

    Ex vivo investigation of the effect of vitamin -A on polymorphonuclear leukocyte functions of patients with measles

    SERKAN AKARSU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2000

    Eczacılık ve FarmakolojiMarmara Üniversitesi

    Farmasötik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ÜMRAN SOYOĞUL GÜRER

Geri Dön