Involvement of autophagy in ochratoxin-a (OTA)-mediated toxicity in HK-2 cell line
HK-2 hücre hattında okratoksin-a güdümlü toksisitede otofajinin katılımı
- Tez No: 371776
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. İBRAHİM YAMAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2014
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Okratoksin-A (OTA) k üf mantar taraf ından üretilen, bir çok çe şitli besin ve yemde bulunan ikincil metabolittir. OTA'nı n nefrotoksik ve karsinojenik etkileri önemli say ıdaki çalışmada g österilmi ş ve OTA olası insan karsinojeni olarak sınıflandırılmıştır. Otofaji, h ücre homeostazını n s ürdürülebilmesi için uzun ömürlü ya da kusurlu organel ve proteinlerin yıkılması i şlemidir. Bu calışmada, insan b öbrek proksimal tübül epitel hücreleri olan HK-2 hücreleri kullanı larak otofaji ve ona bağlı olan MAPK/ERK ve PI3K/AKT yolaklar ının OTA-g üdümlü toksisiteye olan kat ılımı incelenmi stir. OTA-teşvikli zamana ve doza bağlı otofajik aktivite, otofaji ile ba ğlantılı proteinlerden mikrotübül ba ğlayıcı LC3-I proteininin LC3-II'ye d önüşmesine, otofagozom ve asidik kesecikli yapı ları n oluşumuna bağlı olarak test edilmi ştir. 10 M dozlu OTA muamelesinin çok erken saatlerinde otofaji aktive olmu ştur. Bunun yanı nda 6 saatlik OTA muamelesiyle AKT fosforilasyonu artışı g österirken otofagozom oluşumu da azalmaya başlamıştır. Bu sonuçlarla paralel olarak, PI3K/AKT yolağı Wortmannin ile inhibe edildi ğinde otofagozom olu şumunda artış g özlemlenirken, MAPK/ERK yola ğı inhibasyonunun OTA-g üdümlü otofajinin düzenlenmesi üzerinde bir rol ü g örülmedi. OTA aynı zamanda denge durumundaki ubikitinlenmenin seviyesini azalttı . Bu sebeple otofajinin azald ığı ilerleyen saatlerdeki p62/SQSTM1 azal ımı ve asidik yapı lardaki artışı n yine OTA taraf ından tetiklenen ubikitin-proteozom yolağı ndan kaynaklı olabilece gini g österdi. Sonuçlar birlikte ele al ınd ığı nda, bu çalışma OTA'n ın HK-2 h ücrelerinde erken saatlerde otofajiyi tetiklerken, ilerleyen saatlerde PI3K/AKT yola ğının aktive olması yla otofajinin azalt ıldığını g östermektedir.
Özet (Çeviri)
Ochratoxin A (OTA) is a secondary metabolite produced by fungi and found in a variety of food and feed. It is classi ed as a possible human carcinogen and immense amount of work has revealed to its nephrotoxic and carcinogenic properties. Autophagy is a cellular degradation process in which long-lived or defective organelles and proteins are cleared in order to maintain cellular homeostasis. In this study, we investigated the involvement of autophagy and related signaling pathways MAPK/ERK and PI3K/AKT during progression of OTA-induced toxicity in human proximal tubule epithelial HK-2 cell lines. Time- and dose-dependent autophagic activity in response to OTA exposure was tested by examining the alterations of the amount of autophagyrelated proteins, the conversion of microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3)-1 to LC3-II, and by visualization of autophagasomes and acidic compartments. The results showed that OTA at 10 M concentration induces autophagy at very early hours of treatment. After 6 hours, autophagasome formation decreases while AKT phosphorylation is up-regulated. Concordantly, inhibition of PI3K/AKT pathway increases the autophagasome formation while inhibition of MAPK/ERK had no e ect on the regulation of autophagy in response to OTA. OTA has also decreased global steadystate levels of protein ubiquitinylation. In addition, the decrease in p62/SQSTM and increase in acidic vacuoles at later time points when the autophagic activity decreased could be the consequence of OTA-induced fast degradation by ubiquitin proteasome system (UPS) rather than autophagy. Taken together, this study suggest that OTA up-regulates autophagy at early hours of treatment and then down-regulates by the OTA-mediated PI3K/AKT pathway activation at later time points in HK-2 cell lines.
Benzer Tezler
- Investigation of autophagy related markers in brain tissue of early-onset tay - sachs disease mouse models
Erken başlangıçlı tay-sachs hastalığı fare modellerinin beyin dokusunda otofajiyle ilişkili belirteçlerin araştırılması
NURSELİN ATEŞ
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Genetikİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VOLKAN SEYRANTEPE
- The role of atypical and classical protein kinase C isozymes in autophagy and modulation of lysosomal pH by vacuolar ATPase as an alternative treatment approach for Gaucher disease
Atipik ve klasik protein kinaz C isozimlerinin otofaji üzerindeki etkileri ve Gaucher hastalığında V-ATPaz ekspresyonunu artırarak lizozomal reasidifikasyonun sağlanmasının potensiyel terapi stratejisi olarak sunulması
SEVAL KILIÇ
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Moleküler TıpSabancı ÜniversitesiMoleküler Biyoloji, Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. DEVRİM GÖZÜAÇIK
YRD. DOÇ. DR. ÖZLEM KUTLU
- Investigation of the molecular pathways involved in intestinal epithelial differentiation
Bağırsak epitel farklılaşmasında yer alan moleküler yolakların araştırılması
ASLI SADE MEMİŞOĞLU
- Glukozilseramidaz-beta gen mutasyonlarının dopaminerjik nöronlarda α-sinüklein yıkım mekanizmaları üzerindeki etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of glucosylceramidase-beta gene mutations on α-synuclein degradation mechanisms in dopaminergic neurons
GİZEM ÖNAL
Doktora
Türkçe
2021
Tıbbi BiyolojiHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERAP DÖKMECİ
- Investigation of NLRP13's cleavage and its role in macrophage polarization
NLRP13'ün kesiliminin ve makrofaj polarizasyonundaki muhtemel görevinin araştırılması
SEVGİ ÇIRACI
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
BiyolojiBoğaziçi ÜniversitesiMoleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NESRİN ÖZÖREN