Diş kaynaklı kök hücrelerin odontoblastik diferansiyasyonu üzerine D3 vitamininin farklı konsantrasyonlarının etkisinin incelenmesi
Effects of different vitamin D3 concentrations on odontoblastic differentiation of human dental pulp stem cells
- Tez No: 360068
- Danışmanlar: PROF. DR. ELİF SEPET, PROF. DR. AYHAN BİLİR
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Diş Hekimliği, Histology and Embryology, Dentistry
- Anahtar Kelimeler: Dental kök hücre, D3 vitamini, odontoblastik diferansiyasyon, immünohistokimya, taramalı elektron mikroskobu, Dişler, Kök hücreler, Mikroskopi-elektron taramalı, Vitamin D, Dental pulp stem cells, vitamin D3, odontoblastic differentiation, immunohistochemistry, SEM, Teeth, Stem cells, Microscopy-electron scanning, Vitamin D, Immunohistochemistry
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Diş Hekimliği Bölümü
- Bilim Dalı: Pedodonti Ana Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Mucuk, G. (2014). Diş Kaynaklı Kök Hücrelerin Odontoblastik Diferansiyasyonu Üzerine D3 Vitamininin Farklı Konsantrasyonlarının Etkisinin İncelenmesi. İstanbul Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Pedodonti ABD. Doktora Tezi. İstanbul. Kök hücreler; kendi kendine devamlı bölünme yeteneğine sahip olan, en az iki farklı hücre tipine farklılaşabilen özelleşmemiş hücrelerdir. Uygun mikroçevre oluşturularak farklı hücre tiplerine diferansiyasyonları sağlanabilir. Amaç; insan dental pulpa kök hücrelerinin, D3vitamininin farklı konsantrasyonları ile modifiye edilmiş osteo-odontoblastik diferansiyasyon kültüründe (ODK) proliferasyon kapasitesi ve erken dönem dentinogenezis yanıtlarının immunohistokimyasal ve mikroskobik olarak incelenmesidir. 19-25 yaş arası bireylerin üçüncü büyük azı dişlerinden mekanik ayrıştırma metodu kullanılarak kök hücreler elde edilmiştir. Kök hücre kültür medyumu,hücrelerin %70-80 oranında üremesi ışık mikroskobunda izlendikten sonra üç farklı konsantrasyonda D3vitamini ve BMP-2,TGF-β1,FGF2,deksametazon içeren modifiye kültür medyumu ile değiştirilmiş, kontrol grubuna D3vitamini eklenmemiştir. 7.günün sonunda AlkalenFosfataz(ALP) aktivitesi, hücre proliferasyonu ve immünofenotipik analiz Dentin Sialoprotein(DSP) ve STRO-1monoklonal antikorları kullanılarak immünhistokimyasal değerlendirme, SEM ile hücrelerin morfolojik değerlendirilmesi yapılmıştır. Bromodeoxyuridine(BrdU) analizi ile ODK'nın S fazındaki hücrelerde diğer deney gruplarından daha fazla proliferasyonu artırdığı görülmüştür. ODK'nın STRO-1+ hücre oranının 3,5 kat (p<0,005), 0,1 μM D3 vitamini ilavesi ile birlikte ise STRO-1+ hücre oranının 2 kat arttığı (p<0,005) belirlenmiştir. Kültür ortamına 0,1μM ve 0,01μM D3 vitamini ilave edilmesi, DSP+ hücre oranını 1,7 (p<0,005) ve1,3 (p<0,05) oranlarında artırmıştır. Medyuma D3vitamini (0,01 ve 0,001μM konsantrasyonlarda) ilave edilmesi ALP aktivitesini artırmıştır. SEM bulguları tüm deney gruplarındaki hücrelerin; yüzeye iyi tutunan, yoğun üreyen, hücreler arasında sıkı adezyon bulunan ve çok katmanlı hücre kütleleri oluşturmaya eğilimli hücreler olduklarını göstermiştir. Sonuç olarak, modifiye ODK ortamı, insan dental pulpa kök hücrelerinin odontoblast benzeri hücrelere diferansiyasyonunu indüklemiştir. D3 vitamini, primer kültürdeki progenitör hücrelerin odontoblastik diferansiyasyonu, odontoblastik hücrelerin ise proliferasyonu üzerine olumlu yönde etki etmiştir.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Mucuk, G. (2014). Effects of different vitamin D3 concentrations on odontoblastic differentiation of human dental pulp stem cells. Istanbul University, Institute of Health Science, Department of Pedodontics. PhD Thesis. Istanbul. Stem cells are cells that have the ability to renew themselves through mitosis and can differantiate into several specialized cells. The local microenvironment represents an important compartment in maintaining the stem cells status. The aim of this study is to investigate the role of different vitamin D3 concentrations on proliferation capacity and early dentinogenesis responses of human dental pulp stem cells(hDPSCs), in vitro. DPSCs derived from extracted human third molar teeth and the outgrowth digestion method were used for isolation of cells.To investigate the influences of a modified osteo-odontoblastic culture medium(MOCM) consisting of vitamin D3 and BMP-2,TGF-β1, FGF2, dexamethasone(dex) on odontoblast-like cell differentiation,we have analyzed the cell proliferation,level of alkaline phosphatase(ALP) activity and dentin sialoprotein(DSP).Morphological and proliferative analyses,immunophenotype characterization with monoclonal antibodies against STRO-1 and DSP surface receptors were performed. Bromodeoxyuridine(BrdU)incorporation of dividing cells increased after OCM treatment of hDPSCs on the 7th day of culture. OCM treatment of hDPSCs induced a 3.5 fold (p<0,005) increase in percentage of STRO-1 cells, while 0.1μM vitaminD3 addition in culture medium,the increase in the proportion of STRO-1+ cells was two-fold(p<0,005). 0.1μM and 0.01μM vitamin D3 additions in culture medium induced a 1.7(p<0,005) and 1.3(p<0,05) fold increase percentage of DSP+ cells.VitaminD(0.01μM and 0.001μM) in addition with osteogenic supplements increased the ALP activity in hDPSCs. As a conclusion the hDPSCs can be induced to differentiate into odontoblast-like cells using a modified culture medium consisting of vitamin D3, BMP-2,TGF-β1,FGF2 and dex.VitaminD3 treatment stimulated the odontoblastic differentiation of progenitor cells and enhanced the proliferation of odontoblastic cells.
Benzer Tezler
- Periapikal kist kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin dental pulpa kök hücreleriyle karşılaştırılması: İn vitro değerlendirme
Comparison of mesenchymal stem cells derived from periapical cysts with dental pulp stem cells: In vitro evaluation
BURCU PİRİMOĞLU
Doktora
Türkçe
2026
Diş HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiEndodonti Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. CANGÜL KESKİN
- STRO-1 pozitif insan diş germ kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin osteojenik potansiyellerinin değerlendirilmesi
Evaluation of osteogenic potential in STRO-1 positive human tooth germ derived mesenchymal stem cells
PINAR ERÇAL
Doktora
Türkçe
2015
Diş Hekimliğiİstanbul ÜniversitesiAğız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OSMAN ZEKİ GÜMRÜ
- Süt dişi kaynaklı mezenkimal kök hücreler (SHHED), tam gömük yirmi yaş dişi kaynaklı mezenkimal kök hücreler (DPSCS) ve diş folikülü kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (DFSCS) immünolojik özelliklerinin krşılaştırılması
The comparision of immunologic properties of stem cells isolated from human exfoliated deciduous teeth, dental pulp and dental follicle
SELİN YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Allerji ve İmmünolojiMarmara ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUNÇ AKKOÇ
- Kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücre uygulamasının ortodontik diş hareket hızı üzerine etkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the effects of bone marrow derived mesenchymal stem cell aplication on the rate of tooth movement
GÖKÇEN ŞAHİN
Diş Hekimliği Uzmanlık
Türkçe
2020
Diş HekimliğiNecmettin Erbakan ÜniversitesiOrtodonti Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ EMİRE AYBÜKE ERDUR
- Dental folikül kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin ev tozu akarına duyarlı astımlı hastaların lenfositleri üzerine immunolojik etkilerinin invitro ortamda araştırılması
The investigation of immunological effects of dental follicule mesenchymal stem cells on house dust mites sensitive asthma patients' lymphocytes in vitro
ÜLKÜ ARIĞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Allerji ve İmmünolojiMarmara ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TUNÇ AKKOÇ
YRD. DOÇ. DR. ESRA ÇAĞAVİ