Glutatyon S-transferaz enziminin Van Gölü balığı (Chalcalburnus tarichi pallas) karaciğerinden saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of glutathione S-transferase from the liver of Van Lake fish and investigation of some metal ions' effects on enzyme activity
- Tez No: 352153
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Biyokimya, Chemistry, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Van gölü balığı, karaciğer, glutatyon S-transferaz, saflaştırma, karakterizasyon, metal, inhibisyon, Van fish, liver, Glutathione S-transferase, purification, characterization, metal, inhibition
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Glutatyon S-transferaz (E.C.2.5.1.18.: GST) enzimi Van Gölü Balığı karaciğerinden saflaştırıldı. Saflaştırma işlemi homojenatın hazırlanması ve Glutatyon Agaroz afinite kromatografisi olmak üzere 2 basamakta gerçekleştirildi. 29,304 EÜ/mg protein spesifik aktivitesine sahip olan GST enzimi %37,36 verimle, 316,11 kat saflaştırıldı. Enzim aktivitesi spektrofotometrik olarak 340 nm'de Habig metoduna göre ölçüldü. Enzimin tabii molekül kütlesi jel filtrasyon kromatografisi ile 62,35 kDa, alt birimlerinin molekül kütlesi SDS-PAGE ile sırasıyla 28 kDa ve 33,8 kDa olarak bulundu. Enzim için optimum pH Tris/HCl tamponunda pH 7,8, optimum iyonik şiddet 100 mM Tris/HCl, optimum sıcaklık 30ºC olarak stabil pH ise fosfat tamponunda pH 5,5 olarak bulundu. Ayrıca CDNB için KM sabiti 0,891 mM ve Vmax değeri 1,245 EÜ/ml olarak; GSH için ise, KM sabiti 0,060 mM ve Vmax değeri 0,562 EÜ/ml olarak tespit edildi. Van gölü balığı karaciğeri GST enzimi üzerine bazı metal iyonlarının etkileri incelendi ve inhibisyon etkisi gösteren Ag+, Cu+2, Cd+2, Co+2 iyonlar için Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla Ki sabitleri hesaplandı ve inhibisyon tipleri belirlendi.
Özet (Çeviri)
Glutathione S-transferase (E.C. 2.5.1.18.: GST) was purified from the liver of Van lake Fish. The purification consisted of two steps; preparation of homogenate, and glutathione-agarose affinity gel chromatography. GST enzyme having a specific activity of 29.304 EU/ml proteins, was purifield 316.11 times with the yield of %37.36. Enzymatic activity was spectrofotometrically measured according to Habig method at 340 nm. Molecular weight of enzyme was determined by gel filtration chromatography as 62.35 kDa and molecular weight of subunits were determined by SDS-PAGE as 28 kDa and 33.8 kDa. Optimal pH, optimal ionic intensity, optimal temperature and stable pH were determined as 7,8 at Tris/HCl, 100 mM, 30°C and pH 5,5 at phosphate buffer respectively. In addition KM and Vmax values were determined for CDNB as 0.891 mM and 1.245 EU/ml; and for GSH substrates these values determined as 0.060 mM and 0.562 EU/ml. respectively. Moreover, effects of some metal ions on GST enzyme activity of the liver of Van Lake Fish examined. For metal ions which showed inhibition effects such as Ag+, Cu2+, Cd2+, Co2+ ,Ki constants and inhibition types were found out by means of Lineweaver-Burk graphs.
Benzer Tezler
- Glutatyon S-transferaz enziminin Van Gölü inci kefali balığı (Chalcalburnus tarichi ) solungacından saflaştırılması, karakterizasyonu, bazı metal ve pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Purification and characterization of glutathione S transferase from pearl mullet's gill of Van Lake's fish (Chalcalburnustarichi), examination of somemetals and pesticidies' effects of enzyme activity
YAKUP ZARİÇ
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. RAMAZAN DEMİRDAĞ
YRD. DOÇ. DR. EMRAH YERLİKAYA
- Glifosat toksisitesine karşı rosmarinik ve vanilik asitlerin in vitro ortamda biyokimyasal ve antioksidan etkilerinin incelenmesi
Investigation of biochemical and antioxidant effects of rosmarinic and vanilic acids against glyosate toxicity in vitro medium
GÖZDE ÖZCAN
- Endoskopik retrograd kolanjiopankreatikografi (ERCP) ve endoskopik sfinktertominin (ES) karaciğer fonksiyonları üzerine etkisi
Başlık çevirisi yok
GÜRKAN ÖZTÜRK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2004
Genel CerrahiAtatürk ÜniversitesiGenel Cerrahi Ana Bilim Dalı
PROF.DR. YALÇIN POLAT
- Glutatyon-s-transferaz enziminin tavuk eritrositlerinden saflaştrılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of GST from chicken erythrocyte
DEMET KAVRAYAN
- Glutatyon s-transferaz enziminin sığır eritrositlerinden saflaştırılması ve bazı biyokimyasal özelliklerinin incelenmesi
Purification of glutathione s-transferase from bovine erythrocytes and research of some biochemical properties
SERDAR GÜVERCİN