Sildenafil düzeylerinin, pulmoner arteriyal hipertansiyon hasta plazmalarında kromatografik yöntemle belirlenmesi ve“bitkisel kökenli”ürünlerde ilegal varlığının araştırılması
Determination of sildenafil levels in pulmonary arterial hypertension patients'plasma, by chromatographic method and investigation of illegal assets in“plant origin”products
- Tez No: 351440
- Danışmanlar: PROF. DR. GÜLSEREN KARABIYIKOĞLU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Adli Tıp, Forensic Medicine
- Anahtar Kelimeler: Bitkiler, Bitkisel ürünler, HPLC yöntemi, Hipertansiyon-pulmoner, Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı, Pulmoner arter, Sildenafil, Plants, Vegetable products, Hypertension-pulmonary, Chromatography-high pressure-liquid, Pulmonary artery, Sildenafil
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Adli Bilimler Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Sildenafil, fosfodiesteraz tip5 enziminin seçici ve potent bir inhibitörü olup pulmoner hipertansiyon hastalığının (PAH) ve erektil fonksiyon bozukluğunun idame tedavisinde kullanılmaktadır. Bu çalışmada sildenafilin insan plazması ile piyasada“Bitkisel Ürün”ifadesiyle satılmakta olan ürünlerin içeriğindeki varlığını ve düzeyini araştırmak amacıyla yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) ile analiz yöntemi geliştirildi. Bu amaçla özgün, güvenilir, hassas bir metot oluşturuldu ve ilgili test uygulamaları yapılarak metot valide edildi. Plazmadan sildenafil (1mL) izole edilmeden önce içeriğine iç standart olarak verapamil ve 200µL hacimde 1M'lık NaOH eklenerek ortam alkali hale dönüştürülmüştür. Ardından ekstraksiyon işlemi için karışıma 3mL etil asetat konulmuştur. Ekstraksiyon sonrası organik çözücü, azot altında, 40°C'de ve sabit akışta tam kuruluğa kadar uçurulmuş, ardından 200µL mobil fazda yeniden oluşturulmuştur. Kromatografik analiz inertsil C18 ters faz kolon ile 0,8mL/dak akış hızında, %60 asetonitril %40 amonyum asetat tamponlu mobil faz sistemi kullanılarak, 100µL enjeksiyon hacmi ile gerçekleştirildi. Analiz süresi 9 dakika idi. Ekstraksiyon ürünlerinin analizleri ultraviyole dedektör (UV) ile 225nm'de yapılmıştır. Sildenafil ve verapamil'in retansiyon zamanları sırasıyla 6,76 ve 8,01 idi. Doğrusallık (linearity) plazmada 7,16–716ng/mL aralığında incelenmiştir. Gözlenebilme sınırı (LOD) 0,64ng/mL, tayin sınırı (LOQ) ise 1,93ng/mL idi. Metodun doğruluğu (accuracy), gün içinde (%RE) 6,47 ile 5,73, günler arasında ise -7,39 ile 6,45 aralığındadır. Metodun kesinliği (precision) gün içinde (%RSD) 1,74–5,68, günler arasında ise 2,58–6,23 aralığındadır. İncelenen 6 PAH hastasına ait sildenafil plazma dağılımı 27,05–2055,43ng/mL'dir. Sildenafil düzeyleri 914,25±924,75(Ort.±SD) şeklindedir. Piyasada“bitkisel”ifadesiyle satılmakta olan 8 ürünün içeriğinde sildenafil araştırılmıştır. 4 örnekte sildenafil belirlenmiştir. Bu örneklerdeki sildenafil miktarları 10,55-621,28ng/mL aralığında bulunmuş, 176,65±297,32(Ort.±SD) olarak gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Sildenafil is a potent and selective inhibitor of the fosfodiesterase type-5 enzymes and is used in the treatment of pulmonary hypertension disease (PAH) and maintenance of erectile dysfunction. In this study, a high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed in order to determination of sildenafil levels in human plasma and“herbal”products. For this purpose an original, specific, reliable, sensitive method was established and this method were validated. Verapamil was used as an internal standard and plasma was made alkaline by added 200µl NaOH, 1M. 3mL ethyl acetate was added in this mixture for the extraction procedure. After the extraction, organic solvent was evaporated by nitrogen (40°C, constant flow), and then it was reconstituted by 200µL mobile phase. Analysis was 9 minutes. Analysis of extraction products were made by ultraviolet detector (UV) at 225nm. The retention time of sildenafil and verapamil were 6.76 and 8.01, respectively. Linearity was observed the range of 7.16-716 ng/mL sildenafil. Limit of Detection (LOD) and Limit of Quantification (LOQ) were measured 0.64ng/mL and 1,93ng/mL, respectively. Accuracy of the method were observed between 6,47-5,73 and 6.45-7.39 within and without days, respectively. Accuracy of the method were observed between 1.74-5.68 and 2,58–6,23; within and without days, respectively. The plasma sildenafil distribution of 6 PAH patients were observed between 27,05(min)- 2055.43(max)ng/mL. The levels of sildenafil were observed 914.25±924.75(mean±SD). 8 products are being sold in the market were investigated. Sildenafil was determined in 4 specimens. Sildenafil levels were found between 0.55-621.28ng/mL, 176,65±297,32(Ort.±SD), and observed 176.65±297.32(mean±SD), in these specimens.
Benzer Tezler
- Kronik böbrek yetmezliği oluşturulmuş rat modelinde kronik sildenafil uygulamasının erektil fonksiyon üzerine tedavi edici etkisinin moleküler düzeyde değerlendirilmesi
Molecular evaluation of the ameliorative effect of chronic sildenafil administration on erectile function in a rat model of chronic renal failure
ARİF KOL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
ÜrolojiAkdeniz ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN METİN SEVÜK
PROF. DR. MUSTAFA FARUK USTA
- Suraminle oluşturulan sıçan preeklampsi modelinde damar düz kas cevaplarında oluşan değişiklikler üzerine fosfodiesteraz-5 inhibisyonunun etkisi
The effect of phosphodiesterase-5 inhibition on the vessel smooth muscle responses in the preeclampsia model with suramin treated rats
NERGİZ HACER TURGUT
Doktora
Türkçe
2007
Eczacılık ve FarmakolojiCumhuriyet ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. TİJEN KAYA TEMİZ
- Kadmiyum'un neden olduğu karaciğer, akciğer ve böbrek hasarı üzerine Sildenafil'in koruyucu etkisi
Protective effect of Sildenafil on Cadmium-induced liver, lung and kidney injury
AHMET HÜSAMETTİN BARAN
Doktora
Türkçe
2018
Eczacılık ve Farmakolojiİnönü ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖKNUR AKTAY
PROF. DR. FATMA AKAR
- Erektil disfonksiyonlu erkeklerde oral fosfodiesteraz tedavisine cevabı tahmin etmede trombosit cGMP ve cAMP değerlerinin rolü
The role of platelet cGMP and cAMP values in predicting response to oral phosphodiesterase treatment in men with erectile dysfunction
MURAT AKAND