Differentiation of umbilical cord blood mesenchymal stem cells into endothelial cells
Kordon kanı mezenkimal hücrelerinden damar hücre farklılaşması
- Tez No: 350595
- Danışmanlar: DOÇ. DR. HAKAN BERMEK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Biology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İstanbul Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Kalp-damar hastalıkları, batı ülkelerindeki en yaygın ölüm sebebidir. Hastanın yaşamkalitesini arttırmak amacıyla, büyük çaptaki damarlar (>6mm), otolog/allojenikdamar nakilleri ya da sentetik malzemelerin kullanımıyla tedavi edilmektedir. Küçükçaptaki damarların (<6mm) tedavisinde ise hasta ya da donörden uygun ölçütlerdedamarın bulunması çok zorlaşmıştır ve sentetik modeller ya erken tıkanmakta ya dakan akış basıncına dayanamamaktadır. Bu çalışmanın esas amacı, oluşturulacak olanbiyolojik damar modeli için gerekli endotel hücrelerin elde edilmesidir.Kök hücrelerinin, doku mühendisliğinde gelecek vaad eden bir kaynak olduğu kabuledilmiştir. Birkaç senedir kordon kanının, güvenilir bir mezenkimal kök hücre(yüksek farklılaşma kapasitesi gösteren) kaynağı olduğu ortaya çıkmıştır.RosettaSep® ve/veya yoğunluk farkı santrifüjü ile izole edilen kordon kanımezenkimal hücreleri, MesenCult® Besiyeri ya da Standart Besiyeri (Dulbecco'smodified Eagle's besiyeri-düşük glikoz, %30 Fetal Bovine Serum, %0.1 10?7 Mdexamethasone ve %1 L-glutamine içeren) kullanılarak kültüre edilmiştir. StandartBesiyer en iyi büyümeyi sağlayan besi ortamıdır. Ancak, kordon kanından izoleedilen mezenkimal kök hücrelerin sayısının örnekten örneğe büyük farklılıkgösterdiği, insandan insana değiştiği gözlenmiştir. Bunun yanı sıra, mikroskobik veakım sitometrisi analizleri ile, kordon kanından elde edilen mezenkimal kökhücrelerinin, kemik iliğinden elde edilen mezenkimaller gibi fibrilar yapıda, plastikyüzeye yapışan ve mezenkimal antijenlerinin anlatımını yapan özellikte olduğuortaya konulmuştur.Bu çalışmada; farklı oranlardaki damar endotel büyüme hormonunun yardımı ilemezenkimal hücrelerinin endotel benzeri hücrelere farklılaşması denenmiştir.50ng/ml ve 55 ng/ml oranlarındaki büyüme hormonu ihtiva eden EndoCult® besiyerive %20 Fetal Bovine Serum içeren Dulbecco's modified Eagle's besiyeri en iyimezenkimal hücre farklılaşmasını sağlamıştır. Farklılaşan hücreler, fibrilar yapıdandairesel endotel morfolojisini verecek şekilde bir değişime uğramış; ve endotelhücrelere özgü yüzey antijenlerinin yüksek oranda anlatımını gerçekleştirmiştir.Bu çalışma ile, kordon kanı mezenkimal kök hücrelerinin, kalp-damar hastalıklarınıntedavisinde kullanılmak üzere oluşturulacak yapay taşıyıcı için gerekli endotelhücrelere farklılaşma potansiyelleri gösterilmiştir. Gelecekteki çalışmalar için,kordon kanı kök hücrelerinin sayısını hızlı bir şekilde arttıracak güvenilir bir yolunbulunması gerekmektedir; böylece büyük oranlarda saklanması ve arzu edilen birzamanda hiçbir gecikme olmaksızın kullanılması sağlanmış olunur.
Özet (Çeviri)
Cardiovascular diseases are the most common causes of death in western countries.Autolog/allogeneic vessel transplantations or treatment with synthetics grafts areused for vessels with large diameter (>6mm) to improve life expectance of patients.For small-diameter (<6mm) vessel replacement, finding the correct sized samplefrom patient or donor becomes harder and synthetic models occluded too soon orthey cannot resist to the blood flow pressure. The ultimate aim of this study is toproduce endothelial cells as the first most important step of construction of abiological vessel graft.Stem cells have already been accepted as a promising source for tissue engineering inthe near future. Umbilical cord blood became a reliable reservoir of mesenchymalstem cells (showing high plasticity) in the past few years.Mesenchymal cells from cord blood were isolated with the help of RosettaSep®and/or density gradient centrifugation to be cultured in MesenCult® Medium orStandard Medium containing Dulbecco?s modified Eagle?s medium-low glucosesupplemented with 30% Fetal Bovine Serum and 0.1% 10?7 M dexamethasone with1% L-glutamine. Standard Medium was the best growth medium. However, thenumber of isolated mesenchymal stem cells from cord blood samples varied greatlyin samples from person to person. On the other hand, microscopic and flowcytometric analyses proved that cord blood mesenchymal stem cells were same asthe bone marrow mesechymal cells, showing fibroblastoid structure, adherent toplastic surface and expressing mesenchymal markers.In this research, differentiation of these cells into endothelial-like cells with the helpof varying ratios of vascular endothelial growth factor have been tried.Mesenchymal cells treated with 50ng/ml and 55 ng/ml growth factor insideEndoCult® Medium or DMEM with 20%FBS maintained the best differentiationpotential. Differentiated cells transformed from fibrolastoid structure into roundendothelial morphology, expressing highest endothelial specific surface antigens.With this study, the differentiation potential of cord blood mesenchymal stem cellsinto endothelial cells to be used in construction of vessel graft for cardiovasculartreatments was demonstrated. For future applications, a trustworhty and fast way toincrase the number of cord blood stem cells is needed, so that it can be cryopreservedin large numbers and can be used in time of request without any delay.
Benzer Tezler
- Differentiation of vessel wall cells from umbilical cord blood mesenchymal cells for vascular tissue engineering
Damar doku mühendisliği amacıyla kordon kanı mezenkimal hücrelerinden damar duvarı endotel hücre farklılaşması
PINAR HÜNER OMAY
Doktora
İngilizce
2016
Polimer Bilim ve Teknolojisiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. HAKAN BERMEK
- Differentiation of cord blood mesencymal stem cells to bone tissue for tissue engineering applications
Kordon kanı mezenkimal kök hücrelerinden doku mühendisliğinde kullanılmak üzere kemik doku farklılaşması
ELİF KARACA
Yüksek Lisans
İngilizce
2010
Biyomühendislikİstanbul Teknik Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYTEN YAZGAN KARATAŞ
PROF. CANDAN TAMERLER
- Kordon kanı kökenli mezankimal kök hücrelerin kahverengi adipositlere farklılaştırılması
Differentiation of umbilical cord blood derived- mesenchymal stem cells to brown adipocytes
AFROOZ RASHNONEJAD
- Dişeti ve dental folikül dokularında mezenkimal kök hücre araştırılması ve plastisitelerinin karşılaştırılması
Investigation of mesenchymal stem cells from human gingival tissue and comparision of plasticities with dental follicle derived mesenchymal stem cells
TAMER EROĞLU
Doktora
Türkçe
2008
Diş HekimliğiBaşkent ÜniversitesiAğız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İ. SİNA UÇKAN
- İnsan yağ dokusundan elde edilen mezenkimal kök hücrelerin izolasyonu, devamlı kültürünün yapılması, karakterizasyonu ve kriyoprezervasyonu
Human adipose tissue derived mesenchymal stem cell isolation, long-term culture, characterisation and cryopreservation
SERAP YEŞİLKIR
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MELAHAT BAĞIROVA