Geri Dön

Fitaz üreten fungusdan enzimin üretimi, saflaştırılması ve karakterizasyonu

Production, purification and characterization of phytase from phytase producing fungus

PDF İndir

  1. Tez No: 348561
  2. Yazar: GAMZE SEVRİ EKREN
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. KUBİLAY METİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biyoloji, Biyokimya, Biotechnology, Biology, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2013
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Adnan Menderes Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Adnan Menderes Üniversitesi Fen-Edebiyat Fakültesi Biyoloji Bölümü Moleküler Biyoloji Anabilim Dalı stok kültürlerinde kayıtlı havadan ve topraktan izole edilmiş 165 adet fungus fitaz enzimi üretme kapasitesi açısından taranmıştır. Aspergillus niger UA-D suşunun en yüksek aktiviteye sahip olduğu saptanmıştır. Aspergillus niger UA-D suşundan ekstraselüler olarak PSM ortamında üretilen fitaz enzimi amonyum sülfat çöktürmesi, DEAE Sefaroz CL-6B ve Fenil Sepharoz CL-4B işlemleri uygulanarak % 2.6 verimle 73 kat saflaştırılmıştır. SDS-PAGE elektroforezinde tek bant elde edilmiş ve moleküler ağırlığı 65 kDa olarak hesaplanmıştır. Maksimum aktivitesini pH 3.0 ve 70 oC sergilediği bulunmuştur. Enzimin geniş bir sıcaklık ve pH aralığında stabil olduğu saptanmıştır. Enzimin fitik asit için Km değeri 180 µM ve Vmax değeri 54.35 U/mL olarak hesaplanmıştır. Fitaz enziminin geniş bir substrat spesifikliğine sahip olduğu belirlenmiştir. Fitaz aktivitesi, Ba2+ ve Li+ tarafından artarken, Fe2+, Al3+ ve Pb2+ tarafından inhibe olmuştur. Enzim aktivitesi NBS, PMSF, DTNB, 2,3-bütandion varlığında oldukça inhibe olurken, CMC, DTT ve ß-merkaptoetanol ile aktive olmuştur. Bu sonuçlar enzimin katalitik merkezinde triptofan, sistein, serin ve arjinin rezidülerinin önemli rol oynadığı sonucuna varılmıştır. Polihidrik alkollerden gliserol ve sorbitolün sıcaklık stabilitesini artırdığı ve organik çözücülerin ise enzim aktivitesini çok fazla etkilemediği belirlenmiştir.

Özet (Çeviri)

Fungal strains that were isolated from air and soil and registered in Adnan Menderes University Department of Biology culture stocks were screened for phytase activity of 165 fungal strains. Aspergillus niger UA-D. strain showed the highest phytase activity. Extracellular phytase produced by Aspergillus niger in PSM was purified 73-fold with a recovery of % 2.6 referred to the phytase activity in the crude extract using, ammonium sulphate precipitation, DEAE Sepharose CL-6B and Phenyl Sepharose CL-4B. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis of the purified enzyme gave a single stained band at a molecular mass of approximately 65 kDa. The temperature and pH for maximum activity of the enzyme were 70 oC and 3.0, respectively. Km and V max values for phytic acid of the enzyme were calculated to be, 180 µM and 54.35 U/mL, respectively. The phytase exhibited broad substrate specificity. The enzyme was stimulated by Ba2+ and Li+ and strongly inhibited by Fe2+, Al3+ and Pb2+ The enzyme activity was markedly inhibited in the presence of NBS, PMSF, DTNB, 2,3-butanedione suggesting that tryptophan, cysteine, arginine and serine residues play an important role in the catalytic process. Glyserol and sorbitol enhance thermostability of phytase. The enzyme was detemined to be highly stable against organic solvents.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    406459

    Topraktan fitaz enzimi üreten Bacillus sp. suşlarının taranması ve besinsel faktörlerin fitaz üretimi üzerine etkisi

    Screening of phytase enzyme producing Bacillus sp. strains from soil and effect of nutritional factors on the production of phyase

    EREN BAYGIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    MikrobiyolojiUludağ Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ELİF DEMİRKAN

  2. Tez No

    520677

    Expression and activity analyses of industrially important extracellular enzymes produced by a bacilysin knock-out mutant of Bacillus subtilis

    Basilisin biyosentezi susturulmuş Bacillus subtilis mutantı tarafından üretilen endüstriyel öneme sahip enzimlerin gen ifadesi ve aktivite analizleri

    SAMET AYTEKİN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    MikrobiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ

    DOÇ. DR. SEZER OKAY

  3. Tez No

    619637

    Kök kanseri hastalığı [Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)] ile mücadelede biyoajan bakterilerin kullanım imkânlarının araştırılması

    Investigation of possibility of biological control with crown gall [Rhizobium radiobacter (Agrobacterium tumefaciens)] using bioagent bacteria

    NASİBE TEKİNER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    ZiraatAtatürk Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. RECEP KOTAN

  4. Tez No

    102706

    Nargile ve pasif sigara içiciliğinin alveolokapiller membran geçirgenliğine etkisinin belirlenmesinde Tc-99m DTPA aerosol sintigrafisi

    Water-pipe (narghile) smoking effects on pulmonary permeability compared to passive smokers

    AYSEL AYDIN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Radyoloji ve Nükleer TıpDokuz Eylül Üniversitesi

    Nükleer Tıp Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. HATİCE DURAK

  5. Tez No

    482953

    Farklı kemik yoğunluklarında, switch platformlu iki farklı implant sisteminin boyun bölgelerinde meydana gelen kemik rezorbsiyonunun üç boyutlu sonlu elemanlar analizi ile incelenmesi

    An investigation of three dimensional finite elements analysis of bone resorption at the neck area of two different implant systems which switch platform feature on different bone density

    ADALET ÇELEBİ

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Diş HekimliğiDicle Üniversitesi

    Ağız, Diş ve Çene Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BELGİN GÜLSÜN

Geri Dön