Geri Dön

Modifiye TCM-199 medyumunda olgunlaştırılarak in vitro üretilen sığır embriyolarının dondurulması

Vitrification of in vitro produced bovine embryos matured in modified TCM-199

PDF İndir

  1. Tez No: 336814
  2. Yazar: ASİYE İZEM SANDAL
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. ÖZEN BANU ÖZDAŞ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoteknoloji, Veteriner Hekimliği, Biotechnology, Veterinary Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Sığır, Embriyo, Sisteamin, Olgunlaşma, Vitrifikasyon, Dondurarak saklama, Donma, Embriyo kültür teknikleri, Sığırlar, Vitrifikasyon yöntemi, Cattle, Embryo, Cysteamine, Maturation, Cryopreservation, Freezing, Embryo culture techniques, Cattles, Vitrification method
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

İn vitro sığır embriyosu üretiminde antioksidan maddeler, gamet hücrelerini reaktif oksijen türevlerine (ROS) karşı koruma amacıyla tercih edilmektedirler. Çalışmada modifiye TCM-199 medyumunda olgunlaştırılarak in vitro üretilen sığır embriyoları 7. ve 8. günde dondurulmuş, eritme sonrası 48. saatteki gelişimleri kaydedilmiştir. Mezbahadan getirilen ovaryumlardan kesme metoduyla kazanılan oositler seçilerek iki gruba ayrılmıştır. Birinci gruptaki oositler antioksidan bir madde olan sisteamin ilave edilen TCM-199 medyumunda (Grup A), ikinci gruptaki oositler ise sisteamin içermeyen TCM-199 medyumunda (Grup B) 38,8 ºC'de, %5 CO2 içeren inkübatörde 24 saat süreyle olgunlaşmaya bırakılmışlardır. Olgunlaşan oositler IVF-TALP medyumuna aktarılmışlar ve Sperm-TALP medyumuyla yıkanan donmuş boğa sperması ile 1-2x106/mL olacak şekilde 18-22 saat süreyle 38,8 ºC'de, %5 CO2 içeren inkübatörde döllenmeye bırakılmışlardır. Bu süre sonunda Grup A ve B'ye ait embriyolar karıştırma metoduyla denude edilmişlerdir. Her bir gruba ait embriyolar farklı 2 kültür medyumunda, Sentetik Ovidukt Sıvısında (SOF) ve CR1aa-Charles Rosencrans (CR1aa) geliştirilmek üzere 2 alt gruba bölünmüştür. Bu amaçla Grup AI-SOF, Grup AII-CR1aa, Grup BI-SOF ve Grup BII-CR1aa olmak üzere 4 grup oluşturulmuştur. 38,8 ºC'de, %5 CO2, %5 N2 ve %90 nem içeren inkübatörde kültüre edilen embriyolar camlaştırma (vitrifikasyon) metoduyla dondurulmuşlardır. Eritilen embriyolar kendi gruplarına ait CR1 ve SOF kültür medyumlarında 48 saat kültüre edilmişlerdir. Blastosiste ve genişlemiş blastosiste ulaşma oranları sırasıyla %20 %18,1, %24,6 ve %22,5 olarak bulunmuştur. Eritme sonrası gelişimleri sırasıyla %5,5, %23,6, %0 ve %5,2 olarak bulunmuş ve Grup AII-CR1aa lehine olmak üzere P<0,05 düzeyinde istatistiksel önem saptanmıştır. Sonuçta sisteamin, eritme sonrası CR1aa medyumunda gelişimi pozitif yönde etkilemiştir.

Özet (Çeviri)

Antioxidant substances for in vitro embryo production are preferred to protect the gamete cells against reactive oxygen species. In this study, in vitro produced cattle embryos matured in modified TCM-199 media were frozen at the 7th and 8th days, and their development in the 48th hour after thawing were saved. The selected oocytes, obtained from the ovaries brought from slaughterhouse with slicing method, divided into two groups. Cysteamine was added to the first group oocytes in TCM-199 media (Group A), in second group it did not contain cysteamine in its TCM-199 media (Group B), and they were incubated at 38.8 ºC under 5% CO2 for 24 hours. Matured oocytes were transferred into the IVF-TALP media for fertilization with1-2x106/mL frozen bull semen washed with Sperm-TALP media were incubated at 38.8 ºC under 5% CO2 for 18-22 hours. At the end of this period embryos belonging to Group A and Group B were denuded by vortex method. Embryos of each group in two different culture media, Synthetic Oviduct Fluid (SOF) and CR1aa-Charles Rosencrans (CR1aa) were divided into two sub-groups in order to be developed. For this purpose; four groups, Group AI-SOF, Group AII-CR1aa, Group BI-SOF and Group BII-CR1aa were established. Cultured embryos at 38.8 ºC under 5% CO2, 5% N2 and 90% humidity were frozen with vitrification method. Thawed embryos were incubated in CR1aa and SOF culture medias of their groups for 48 hours. The rate of reaching to the blastocyst and expanded blastocyst stages were detected as 20%, 18.1%, 24.6% and 22.5%, respectively. The development after thawing was detected as 5.5%, 23.6%, 0% and5.2%, respectively and in favor of Group AII-CR1aa statistical significance was detected at the level of P<0.05. In conclusion, cysteamine had a positive effect on development after thawing in CR1aa media.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    923082

    Sığır embriyolarının OPS ve modifiye payet yöntemiyle vitrifikasyonu

    Vitrification of bovine embryos by OPS and modified straw method

    ŞÖHRET GÜLER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Veteriner HekimliğiBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Veteriner Doğum ve Jinekoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. YUNUS ÇETİN

  2. Tez No

    67456

    Modifiye flotasyon kolonunda ince tanelerin sürüklenmesi ve iri taneli cevherlerin zenginleştirilmesi

    Entrainment of fine particles and encrichment of coarse-particle ores in modified flotation column

    KEMAL BİLİR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Maden Mühendisliği ve MadencilikEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Maden Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BAHRİ ÖTEKAYA

  3. Tez No

    843759

    Çocuklarda ameliyat sonrası görülen akut ağrı ve bulantı-kusma arasındaki ilişkide ameliyat öncesi yaşanan anksiyetenin aracı etkisi

    The intermediate effect of pre-surgery anxiety on the relationship between acute post-operative pain and nause-vomiting in children

    AYTÜL ÇOBAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    HemşirelikHasan Kalyoncu Üniversitesi

    Hemşirelik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ZERRİN ÇİĞDEM

  4. Tez No

    460263

    Serebral palsili çocuklarda alt ekstremite robotik rehabilitasyon tedavisinin spastisite ve elektrofizyolojik bileşenleri ile fonksiyonel bağımsızlık üzerine etkisi

    The effect of lower extremity robotic rehabilitation therapy on spasticity and electrophysiological components and functional independence in children with cerebral palsy

    YAĞMUR POLAT

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Fiziksel Tıp ve RehabilitasyonSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Fiziksel Tıp ve Rehabilitasyon Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NİLÜFER KUTAY ORDU GÖKKAYA

  5. Tez No

    606617

    Akut lenfoblastik lösemili olgularda akım sitometri ile immunfenotipleme ve prognoz ilişkisi

    Effect of immunophenotyping with flow cytometry on prognosis for childhood acute lymphoblastic leukemia: A single center experience

    SULTAN AYDIN KÖKER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    HematolojiSağlık Bakanlığı

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FERAH GENEL

Geri Dön