Erken embriyonik dönemde alkalozdan savunma mekanizmasının incelenmesi
Investigation of activity changes of anion exchanger against intracellular alkalosis during early preimplantation embryonic stages
- Tez No: 331502
- Danışmanlar: PROF. DR. ŞEREF ERDOĞAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Fizyoloji, Physiology
- Anahtar Kelimeler: Anyon değiştirici, fare, hücre içi pH düzenlenmesi, zigot, embriyo, Alkaloz, Anyonlar, Fareler, Hidrojen iyon konsantrasyonu, Hücreler, Anion exchanger, mouse, intracellular pH regulation, zygote, embryo, Alkalosis, Anions, Mice, Hydrogen-ion concentration, Cells
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Çukurova Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Hücre içi pH (pHi) düzenlenmesi, temel homeostatik mekanizmalardan biridir. Bu düzenleme, alkali şoklara karşı HCO3-/ Cl- değiştiricisi (AE), asidik şoklara karşı ise Na+/H+ ile Na+,HCO3-/Cl- değiştiricileri ile gerçekleştirilir. Yeni canlının gelişimini sağlayacak olan oosit ve sonuçta gelişen embriyoların sağlıklı olabilmesi için, bu düzenleyicilerle pHi değerlerini dar sınırlar içinde tutmaları gerekir. Yapılan çalışmalar, profaz I aşamasındaki oositlerde AE aktif iken mayotik matürasyon sürecinde bu değiştiricinin baskılandığını göstermiştir. Bu çalışmada ise, saptanan bu değişimin daha sonraki embriyonik gelişim aşamalarında, pronüklear zigottan (PN) sekiz hücreli (8h) embriyolara kadar, incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada beş ? sekiz haftalık matür Balb/c soyu farelere süperovülasyon protokolü uygulanarak ve kopülasyonları sağlanarak uygun zamanlarda PN zigot, iki hücreli (2h), dört hücreli (4h) ve 8h embriyolar elde edildi. Kültür ve kayıt solüsyonları olarak KSOM esaslı solüsyonlar kullanıldı. Elde edilen zigot ve embriyolar, pH-sensitif florofor 2,7 bis karboksi etil 5-6 karboksi florosin (BCECF) ile yüklendi ve mikrospektrofluorometrik yöntem ile ratiometrik olarak pHi kayıtları alındı. Cl- uzaklaştırma metodu ile AE aktivitesi fonksiyonel olarak saptandı. Zigot/embriyoların amonyum puls tekniği ile indüklenen alkalozdan iyileşmeleri ve bu iyileşmelerin AE inhibitörü DIDS ile etkilenmesi incelendi. Hücreleri alkali şoklardan koruyan AE aktivitesi, PN zigot aşamasında yüksek iken (0,068±0,01 pHU/dk) 2h, 4h ve 8h embriyo aşamasına kadar olan gelişimsel süreçte giderek azaldı (pHU/dk olarak sırasıyla; 0,058±0,01; 0,042±0,01 ve 0,033±0,01). Aktivitedeki bu azalma 8h aşamada, PN zigot ve 2h embriyo değerlerine göre, istatistiksel olarak anlamlı idi (p<0,05). PN zigot ve tüm embriyo aşamalarında indüklenmiş alkali şoklardan tam olarak iyileşme gerçekleşti. Çalışılan PN zigot, 2h ve 4h embriyolarda AE aktivitesi, ortama eklenen DIDS ile anlamlı olarak baskılandı ancak DIDS, 8h embriyolarda etkisiz idi. Preimplantasyon aşamalarında bulunan PN zigot, 2h, 4h ve 8h embriyoların gelişim sürecinde AE aktivitesi giderek azalmakta, buna karşın çalışılan tüm aşamalarda alkalozdan iyileşme tam olarak gerçekleşmektedir. Bu iyileşme PN zigot, 2h ve 4h embriyolarda AE aktivitesi sayesinde olmakta iken 8h embriyolarda alkalozdan iyileşmenin doğası saptanamamıştır. Bu bulgular ışığında, gelişmekte ve metabolizmaları değişmekte olan embriyoların (daha fazla asidik yük oluştururlar), alkali ovidukttan asidik uterusa ilerlerken, metabolizma ve dış ortamlarına uygun şekilde savunma mekanizmalarını oluşturdukları sonucuna varılabilir.
Özet (Çeviri)
Intracellular pH (pHi) regulation is an important component of mammalian cell homeostasis. pHi is maintained within a narrow range by three major regulatory-mechanisms: the HCO3-/Cl- exchanger (AE), which alleviates alkalosis, and the Na+/H+ (NHE) and Na+-dependent HCO3-/Cl- (NDCBE) exchangers, both of which alleviate acidosis. pHi should be kept within narrow range by these regulators for healthy developing embryos, as well. Findings of studies performed showed that although AE activity of oocyte at prophase I stage high, this activity is inhibited during meiotic maturation. In this study, we aimed to investigate AE activity during early preimplantation embryonic developmental process, from PN zygote to 8-c stage. In this study, PN zygotes, two-cell (2-c), four-cell (4-c), eight-cell (8-c) stage embryos were obtained by classical procedure from 5-8 week old mature female Balb/c strain mouse following superovulation protocol. KSOM based solutions were used as culture and recording solutions. Intracellular pH (pHi) was recorded by using microspectrofluorometric technique from zygotes/embryos which were loaded with pH-sensitive florophore, BCECF. AE activity was determined by Cl- removal assay. Function of AE was investigated using recovery response from induced-alkalosis and confirmed by DIDS, specific inhibitor of AE. While AE activity was high at PN zygotes (0,068±0,01 pHU/min), this activity gradually decreased as embryos develop to 2-c, 4-c and 8-c stages (in pHU/min; 0,058±0,01, 0,042±0,01 and 0,033±0,01, respectively). These activity changes were statistically significant at PN zygote and 2-c embryo when compared to 8-c stage (p<0,05). Complete recovery from induced-alkalosis was determined at all-stages of embryos; and, DIDS inhibited these recovery responses at all stages except 8-c embryo. In the light of these findings, it is possible to conclude that embryos, which are developing and changing their metabolisms, constitute appropriate defense mechanisms in accordance with the environment, as they move along from alkaline oviduct to acidic uterus.
Benzer Tezler
- Kuluçka öncesi ve erken embriyonik dönemde döllü ve dölsüz tavuk yumurtasının pander nükleusu ve embriyonik disk hücreleri üzerinde ışık mikroskobik incelemeler
Light microscopis investigations on pander's nucleus and embryonic disc cells of the fertilized and unfertilized chicken egg at preincubation and early incubation periods
MAHMUT KÜÇÜKKÖMÜRCÜ
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
BiyolojiSelçuk ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İLHAMİ ÇELİK
- Erken tavuk embriyolarında pregabalinin orta hat kapanmasına etkisi
The effect of pregabalin on closure of the midline in early chicken embryos
ERCAN ARMAĞAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2009
NöroşirürjiAnkara ÜniversitesiNöroşirürji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AĞAHAN ÜNLÜ
- Prenatal dönemde holoprozensefali saptanan olgularda genetik etiyopatogenezin yeni nesil dizileme yöntemi ile araştırılması
Başlık çevirisi yok
ÖZGE HACER DEMİRBİLEK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Genetikİstanbul ÜniversitesiTıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖZDE YEŞİL SAYIN
- Köpeklerin erken gebelik döneminde matriks metalloproteinazların ve doku uyuşum antijenlerinin uterus ve plasentada belirlenmesi
The uterine and placental expression of matrix metalloproteinases and major histocompatibility complex during early canine pregnancy
HAKKI BÜLENT BECERİKLİSOY
Doktora
Türkçe
2007
Moleküler TıpAnkara ÜniversitesiVeterinerlik Doğum ve Jinekolojisi Ana Bilim Dalı
PROF.DR. SELİM ASLAN
- Fare embriyonik kök hücrelerinden faklılaştırılan keratinositlerin diyabetik yara modeli iyileşmesi üzerine etkisinin moleküler düzeyde analizi
Molecular analysis of the effect of keratinocytes from mice embriyonic stem cells onto wound model
ŞÜKRÜ KASAP
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiDokuz Eylül ÜniversitesiPlastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ BARUTÇU