Aeribacillus pallidus (P26) bakterisinden peroksidaz enziminin saflaştırılması ve kinetiğinin araştırılması
Purification and characterization of peroxidase from Aeribacillus pallidus (P26)
- Tez No: 324712
- Danışmanlar: DOÇ. DR. AHMET ADIGÜZEL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mikrobiyoloji, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Karakterizasyon, Peroksidaz, Pirogallol, Saflaştırma, Characterization, Peroxidase, Pyrogallol, Purification
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Peroksidaz (POD; EC 1.11.1.7), akseptör olarak rol yapan hidrojen peroksitin ve hidrojen atomlarının donörü olarak görev alan, başka bir bileşiğin de bulunduğu bir reaksiyonu katalize eden bir oksidoredüktazdır. Bu çalışmada peroksidaz enzimi (POD), Erzurum-Pasinler kaplıcasından izole edilen termofilik Aerobacillus pallidus'dan (P26) (Gen bank no:EU935591) ekstraselüler olarak üretilmiş, amonyum sülfat çöktürmesi, CM-Sephadeks iyon değişim kromatografisi ve Sephakril S200 jel filtrasyon kromotografisi yöntemleri ile saflaştırılmıştır. Karakterizasyon çalışmalarında 4-metil katekol, H?O?, ABTS, pirogallol substrat çiftleri kullanılarak her bir substrat için ayrı ayrı optimum pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla 7.0, 60°C belirlenmiştir. Bu çalışmada en iyi aktivite veren pirogallol substratı kullanılarak stabilite pH ve sıcaklık değerleri tespit edilmiştir. Ayrıca her bir substrat için Lineveawer-Burk grafiklerinden yaralanılarak Km ve Vmax değerleri ayrı ayrı hesaplanmıştır. Bunun yanında çalışmalarımızda peroksidaz enzimi aktivitesi üzerine etki eden bazı metal iyonları incelenmiştir. Enzimin molekül kütlesi 31 kDa olarak bulunmuştur. Bu işlemde ilgili enziminin bazı tekstil boyalarının atık sularda giderilmesi işlemini nasıl etkilediği incelenmiştir. Elde edilen bulgulardan saflaştırılan ve karakterize edilen peroksidaz enziminin katalaz-peroksidaz sınıfına ait olduğu tespit edilmiştir.
Özet (Çeviri)
Peroxidase (POD, EC 1.11.1.7), which role as acceptor of hydrogen peroxide and hydrogen atoms acts as a donor. which catalyzes a reaction of another compound, including is an oxidoreductase. In this study, enzyme of peroxidase was produced extracellular from thermophilic Aerobacillus pallidus (P26) and isolated from the Erzurum-pasinler spring (Gen Bank NO: EU935591) and purified of ammonium sulphate, sephacril S200 gel in filtration chromatography, CM-sephadex ion changing chromatography and precipitation. In characterization studies, 4-metil katekol, H2O2, ABTS, pyrogallol, substrate pairs were used separate optimum PH and temperature values were determined 7 and 60°C respectively. For each substrate, Km and Vmax values were calculated from Lineweaver-Burk graphs. For each substrate, effects of some metal ions on peroxidase activity was examined. Molecular mass of the enzyme was found as 31 kDa by using gel filtration. In this process, how rationed enzyme effected the process of removal of textile stains in waste water is examined. In addition to this, peroxidase enzyme found belonged to the class of catalase-peroxidase.
Benzer Tezler
- Aeribacillus pallidus AC6'da yüksek seviyede ekspres edilen flagellin geninin (hag) klonlanması, promotor yapısı, flagellar spesifik transkripsiyon faktörünün (sigma-d) izolasyonu ve saflaştırılması
Cloning and promoter architecture of flagellin gene (hag) expressed at high-level and isolation and purification flagellar-specific transcription factor (?d) in Aeribacillus pallidus AC6
ELİF SEVİM
Doktora
Türkçe
2010
BiyolojiKaradeniz Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ OSMAN BELDÜZ
- Aeribacillus pallidus C10'dan alkalin proteaz enziminin saflaştırılması,karakterizasyonu ve biyoteknolojik uygulanabilirliği
Purification, characterization and investigation of biotechnological applications of alkaline protease enzyme from Aeribacillus pallidus C10
VİLDAN YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
BiyoteknolojiAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MELDA ŞİŞECİOĞLU
- Balıkesir ve Kütahya bölgesindeki bazı termal kaynakların prokaryotik çeşitliliğinin incelenmesi
Investigation of prokaryotic diversity of some thermal springs in Balikesir and Kutahya district
EMİNE ÇELİKOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyolojiAnadolu ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MERAL YILMAZ CANKILIÇ
- Erzurum ılıca kaplıcalarından alınan su örneklerinden termofilik bakterilerin izolasyonu, identifikasyonu ve Bacillus thermoamylovorans ST-10 izolatından lipaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu
Isolation, identification of thermophilic bacteria taken from ilica thermal spri̇ngs of erzurum and purification, characterization of li̇pase enzyme from Bacillus thermoamylovorans ST-10
SELMA TARAKÇIOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
MikrobiyolojiAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET ADIGÜZEL
- Rize ayder kaplıcalarından alınan su örneklerinden termofilik bakterilerin izolasyonu, identifikasyonu, ksilanaz enziminin geobacillus galactosidasius BS61 bakterisinden saflaştırılması ve karakterizasyonu
Isolation, identification of thermophilic bacteria taken from ri̇ze ayder thermal springs, purification and characterization of xylanase enzyme from geobacillus galactosidasius BS61
BİLGE SARI
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
MikrobiyolojiAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET ADIGÜZEL