Pyrin proteininin hücre göçü üzerine etkisinin incelenmesi
Investigating the effect of pyrin protein on cell migration
- Tez No: 282297
- Danışmanlar: PROF. DR. ENGİN YILMAZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Ailevi akdeniz ateşi, Hücre hareketleri, Kolşisin, Pirin, Proteinler, Familial mediterranean fever, Cell movement, Colchicine, Pyrin, Proteins
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Ailesel Akdeniz Ateşi inflamatuar epizotlarla belirgin otoinflamatuar otozomal resesif olarak kalıtılan bir hastalıktır. Hastalığın ülkemizdeki prevelansı 1:1000'dir. Hastalık için ilk tercih ilaç, hem epizotlara iyi gelen hem hastalığın amiloidoz gibi uzun dönem komplikasyonlarını engelleyen kolşisindir. Hastalıktan sorumlu olan ve yanlış çalışan protein, inflamasyon kontrolünde, apoptozda ve sitokin salınımında pek çok rolü olduğu gösterilmiş pyrindir. Bunun yanında pyrinin iyi bilinen hücre göçü düzenleyicileri olan PSTPIP1 ve aktin ile etkileşime girerek hücre göçünün kontrolünde de bazı rolleri olduğu ileri sürülmüştür. Bugüne kadar pyrinin hücre göçü üzerindeki doğrudan etkileri gösterilmemiştir. Mikrotübül iskeletinin genel yapısını bozmayan en yüksek kolşisin derişimi, hücre ölümünün ölçülmesi ve hücre iskeleti ile organel boyamaları yapılarak saptanmıştır. Bu çalışmada kullanılan uygun kolşisin derişimleri, COS-7 ve HeLa hücreleri için sırasıyla 10ng/ml ve 7,5ng/ml olarak bulunmuştur. Yara iyileşmesi deneylerinde, yara sınırında kontrol grubu ile karşılaştırıldığında artmış sayıda aşırı pyrin ifade eden hücre saptanmıştır (p<0.01). Doğal pyrin, mutant pyrin (M694V, M680I ve V726A mutasyonlarını taşıyan) ve kolşisinin geçici transfekte insüline karşı göç eden COS-7 hücrelerindeki rolünü belirlemek için filtre deneyleri kullanılmıştır. Filtre deneylerinde, kontrol grubunda veya pyrin mutantlarında görülmemesine karşın, doğal pyrin ile artmış hücre göçü arasında anlamlı bir ilişki kurulmuştur (p<0,01). Buna ek olarak, kolşisin uygulaması pyrin veya mutant pyrin ifade eden hücrelerde hücre göçünü negatif yönde etkilerken (p<0,05) kontrol grubunda anlamlı bir diapedez artışına neden olmuştur (p<0,05). Burada sunulan veriler, pyrinin hücre göçünün kontrolünde doğrudan görevleri olduğunu göstermektedir. Bu sonuçlar, pyrin proteininin PSTPIP1, aktin veya henüz bilinmeyen; ancak büyük olasılıkla MAPK sinyal yolağındaki proteinlerle etkileşimleri aracılığıyla olabilir. Kolşisinin hücre göçünü baskılayan etkilerinin sadece doğal veya mutant pyrin varlığında ortaya çıkması da dikkat çekilmesi gereken önemli bir noktadır. Bu konudaki ilerleyen araştırmalar inflamatuar hücrelerde hücre göçünün yeni kontrol mekanizmalarının keşfine yol açıp genel olarak tüm inflamatuar hastalıklar için yeni tedavi olasılıklarının kapılarını açabilir.
Özet (Çeviri)
Familial Mediterranean Fever is an autosomal recesively inherited, autoinflammatory disease characterized by inflammatory episodes. The prevalance of disease is 1:1000 in Turkey. The drug of choice for the disease is colchicine which both relieves the patient from episodes and prevents late complications like amyloidosis. The abberantly acting protein responsible for the disease is pyrin, shown to have several roles in inflamation control, apoptosis and cytokine secretion. Furthermore, pyrin was suggested to have several roles in the control of cell migration through its interaction with well-known regulators of cell migration, PSTPIP1 and actin. Until today direct effects of pyrin on cell migration have not been shown. Appropriate concentration of colchicine that would not disturb general microtubule skeleton was determined through cell death measurement, cytoskeleton and organelle staining. The appropriate concentration that was used in this study for COS-7 cells and HeLa cells were determined respectively as 10ng/ml and 7.5ng/ml. In wound healing assays, we noted an increased number of pyrin overexpressing HeLa cells neighboring the wound border compared to control group (p<0.01). Boyden chamber assays were used to determine the role of pyrin, its mutants, namely M694V, M680I, V726A, and colchicine in transiently transfected COS-7 cells migrating against an insulin gradient. In Boyden chamber assays, a positive significant relationship between wild type pyrin overexpression and increased cell migration was shown (p<0.01), which was not observed in either control group or mutants of pyrin. In addition, colchicine treatment would negatively affect cell migration in either wild or mutant pyrin overexpressing COS-7 cells (p<0.05) while colchicine caused a significant increase in diapedesis in control group (p<0.05). The data presented here shows direct involvement of pyrin in control of cell migration. This maybe either through pyrin protein?s interaction with PSTPIP1 or actin, or a different yet unknown mechanism possibly involving MAPK signaling pathway. Colchicine?s cell migration abolorating effects appearing only in the presence of wild type or mutant pyrin is also another interesting point to note. Further research in this subject may lead to discovery of novel mechanisms controlling cell migration in inflammatory cells and would result in novel treatment options for inflammatory diseases in general.
Benzer Tezler
- Hücre göçü sürecinde pyrin-pstpip1 ilişkisinin incelenmesi
Analyzing the pyrin-pstpip1 relation during cell migration
ZÜLFİYE YELİZ AKKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
GenetikHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ENGİN YILMAZ
- Kolşisinin pyrin ve pyrin ile ilişkili proteinler üzerine etkisi
The effect of colchicine on pyrin and pyrin-interacting proteins
ZİHNİ EKİM TAŞKIRAN
Doktora
Türkçe
2012
Moleküler TıpHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ENGİN YILMAZ
- A study on the localization of alternative MEFV transcripts in neutrophil-like cells
MEFV alternatif transkriptlerinin nötrofil benzeri hücrelerde lokalizasyon çalışması
ŞULE ERDEMİR
Yüksek Lisans
İngilizce
2013
Genetikİstanbul Teknik Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. EDA TAHİR TURANLI
- İnflamatuvar hücre göçü sürecinde pyrin ve aktin ile ilişkili proteinlerin moleküler analizi
Molecular analysis of pyrin and actin-related proteins during inflammatory cell migration
CANSIN GÜLER
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
Tıbbi BiyolojiHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BANU PEYNİRCİOĞLU
- Otoinflamatuvar hastalıklarda inflamazom bileşenlerinin hücre göçü sürecinde incelenmesi
Investigation of inflammasome components during cell migration process in autoinflammatory diseases
TAYFUN HİLMİ AKBABA
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Tıbbi BiyolojiHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BANU PEYNİRCİOĞLU