Geri Dön

Reversible immobilization of catalase by metal chelate affinity interaction on a new generation matrix

Yeni nesil matriks üzerine metal şelat afinite etkileşimi ile katalazın tersinir immobilizasyonu

PDF İndir

  1. Tez No: 276595
  2. Yazar: TÜLDEN KALBURCU
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. M. NALAN TÜZMEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Biyokimya, Chemistry, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Enzim immobilizasyonu, Katalaz, Enzyme immobilization, Catalase
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Bölümü
  12. Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

p(AAm-AGE) kriyojel, akrilamit ve allil glisidil eterin radikalik polimerizasyonu ile hazırlanmıştır. Cibacron Blue F3GA, p(AAm-AGE) kriyojel üzerine reaktif boyanın klor grupları ile allil glisidil eterin epoksit grupları arasındaki reaksiyon sonucu kovalent olarak bağlanmıştır. Cibacron Blue F3GA bağlanan p(AAm-AGE) kriyojel ile Fe(III) iyonları arasında şelat oluşturulmuştur. p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) kriyojel, FTIR, SEM analizleri and şişme derecesinin belirlenmesi ile karakterize edilmiştir. 25,8µmol Fe(III) iyonları içeren IMAC kriyojel, farklı koşullarda (pH, başlangıç protein konsantrasyonu, sıcaklık, akış hızı ve iyonik şiddet) adsorpsiyon çalışmalarında kullanılmıştır. Maksimum adsorpsiyon kapasiteleri p(AAm-AGE)-CB ve p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) kriyojelleri için sırayla 75,7 mg/g ve 60,6 mg/g olarak belirlenmiş ve g kriyojel başına adsorplanan miktar pH 6,0'da 1,5mg/mL derişimde doygunluk değerine ulaşmıştır. Michealis-Menten sabiti ve Vmax değerlerinin p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) kriyojel üzerine katalaz adsorpsiyonuyla belirgin olarak değiştiği belirlenmiştir. Michealis-Menten sabiti serbest katalaz için 0,73 g/L, immoblize katalaz için 0,18 g/L olarak belirlenmiştir. Serbest enzymin Vmax değeri (2000 U/mg enzim) immobilize enziminkinden düşük (2500 U/mg enzim) bulunmuştur. İmmobilize katalazın serbest enzime göre daha geniş sıcaklık aralığında daha yüksek aktivite gösterdiği belirlenmiştir. Ayrıca, p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) kriyojel üzerine enzimin defelarca adsorplanıp desorplanabildiği belirlenmiştir.

Özet (Çeviri)

p(AAm-AGE) cryogel was prepared by radical polymerization of acylamide and allyl glycidyl ether. Cibacron Blue F3GA is covalently attached on p(AAm-AGE) cryogel, via the reaction between the chloride groups of the reactive dyes and the epoxide groups of the AGE. Cibacron Blue F3GA attached p(AAm-AGE) cryogel was chelated with Fe(III) ions. p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) cryogel was characterized by FTIR, SEM and swelling degree analysis. The IMAC cryogel carrying 25.8µmol Fe(III) ions was used in adsorption studies under different conditions (i.e., pH, protein initial concentration, flow rate, temperature and ionic strength). Maximum adsorption capacities were found to be 75.7 mg/g for p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) cryogel and 60.6 mg/g for p(AAm-AGE)-CB cryogel, respectively, and the adsorbed amounts per unit mass of cryogel reached to a plateau value at about 1.5mg/mL at pH 6.0. Michealis-Menten constant and Vmax values were significantly affected by adsorption of catalase onto the p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) cyyogel. The Km values were found to be 0.73 g/L for the free catalase and 0.18 g/L for the immobilized catalase. The Vmax value of free catalase (2.0x103 U/mg enzyme) was found to be lower than that of the immobilized catalase (2.5x103 U/mg enzyme). Activity of immobilized catalase was determined higher in a wider temperature range than the free enzyme. It was also observed that enzyme could be repeatedly adsorbed and desorbed on the p(AAm-AGE)-CB-Fe(III) cryogel.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    197105

    Preparation of immobilized metal affinity sorbents

    İmmobilize metal afinite sorbentlerinin hazırlanması

    MÜFRETTİN SARI

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. ADİL DENİZLİ

  2. Tez No

    493660

    Farklı fonksiyonel gruplar içeren polimerik filmlerin tasarımı ve katalaz enziminin tersinir adsorpsiyonu çalışmaları

    Design of polymeric films with different functional groups and studies of reversible adsorption of catalase

    MUHAMMED İRFAN TÜRKER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    KimyaGazi Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLAY BAYRAMOĞLU

  3. Tez No

    169511

    İmmobilize circinella sp. hücreleri ile lipaz üretimi ve optimizasyonu

    Production and optimization of lipase by immobilisedcells of circinella sp

    YUSUF BARKUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    BiyoteknolojiEge Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    Y.DOÇ.DR. ALİ KILINÇ

    Y.DOÇ.DR. İHSAN YAŞA

  4. Tez No

    309463

    Tersinir katılma-ayrılma zincir transfer polimerizasyonu ile silikon disk yüzeyine kovalent bağlı poli[(ar-vinilbenzil)trimetilamonyum klorür] fırça sentezi ve dna immobilizasyonunda kullanımı

    Synthesis of poly[(ar-vinylbenzyl)trimethylammonium chloride] brush covalently attached to silicon disc surface by reversible addition-fragmentation chain transfer polymerization and its use for dna immobilization

    SERKAN DEMİRCİ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    KimyaGazi Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TUNCER ÇAYKARA

  5. Tez No

    374476

    Fotodesenlenmiş polimerik fırçaların tersinir katılma-ayrılma zincir transfer (RAFT) tekniği ile sentezi, karakterizasyonu ve biyofonksiyonel yüzey olarak kullanımı

    Synthesis and characterization of photopatterned polymer brushes by reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) technique and their use as biofunctional surface

    DİLEK ÇİMEN EREN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Polimer Bilim ve TeknolojisiGazi Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TUNCER ÇAYKARA

Geri Dön