Cevizden (Juglans regia L.) paraoksonaz enziminin saflaştırılması, karakterize edilmesi ve bazı pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkisinin araştırılması
Purification and characterization of paraoxonase enzyme from the walnut (Juglans regia L.), research the effects of some pesticides on enzyme activity
- Tez No: 270727
- Danışmanlar: PROF. DR. NAZAN DEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada cevizden (Juglans regia L.) paraoksonaz (PON) enzimi saflaştırıldı ve karakterize edildi. Paraoksonaz enziminin saflaştırılmasında afinite kromatografisinden faydalanıldı. Cevizden (Juglans regia L.) saflaştırılan paraoksonaz enziminin saflığını kontrol etmek ve alt birim sayısını belirlemek için SDS-PAGE elektorofezi uygulandı.Enzimin substrat spesifikliğinin belirlenmesi amacıyla, paraokson ve fenilasetat substratları denenmiş ve aktivetesi daha yüksek olan paraokson aktivite ölçümlerinde ağırlıklı olarak kullanılmıştır.Enzimin optimum pH ve sıcaklık değerleri tespit edilerek paraokson ve fenilasetat substratları için KM ve Vmax değerleri belirlendi. Paraokson için Vmax ve KM değerleri sırasıyla: 0,062 ? g/L.dak ve 0,038 mM, fenilasetat için Vmax ve KM değerleri sırasıyla: 0,038 ? g/L.dak ve 0,018 mM olarak bulundu.Enzim aktivitesi üzerine 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM konsantrasyonlarında, Mg2+, Ca2+, Cu2+, Mn2+, Zn+2, Fe+3 katyonlarının ve EDTA, Askorbik Asit, ß ß-Merkaptoethanol ve SDS bileşiklerinin etkisi denendi. Ca2+, Fe+3'ün paraoksonaz enzim aktivitesini arttırdığı bulundu. Mn2+, Zn+2'nin yüksek konsantrasyonlarda enzim aktivitesini kısmen inhibe ettiği belirlendi. ß-Merkaptoethanol, EDTA, Askorbik Asit ve SDS'nin yüksek konsantrasyonlarda enzimi inhibe ettiği belirlendi.PON enzim aktivitesi üzerine 100 ppm, 10 ppm, 1 ppm klorprifos etil, metil paratiyon, dimetoat, diklorvos, diazinon, metamidopos, etil paratiyon ve fention pestisitlerinin etkisi araştırıldı. Bu pestisitlerin paraoksonaz enzim aktivitesini arttırdığı bulundu.
Özet (Çeviri)
In this study; the paraoxonase enzyme was purified and characterized from the walnut (Juglans regia L.). Affinity chromatography was used for purification of the paraoxonase. SDS-polyacrilamide gel electrophoresis was applied for control of the paraoxonase enzyme purified from the walnut (Juglans regia L.).KM and Vmax values for paraoxon and phenyl acetate substrates were determined after setting optimal pH and temperature conditions of paraoxonase enzyme. Vmax and KM values for paraoxon were determined as 0,062 ? g/L.min ve 0,037 mM. Vmax and KM values for phenyl acetate were determined as 0,038 ? g/L.min ve 0,018 mM.Effects of 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM Mg2+, Ca2+, Cu2+, Mn2+, Zn+2, Fe+3 cations and 10 mM, 1 mM ve 0,1 mM EDTA, Ascorbic Asid, ß-Merkaptoethanol, SDS compounds on enzyme activity were researched. It was found that Ca2+ and Fe+3 activated the enzyme. It was determined that high concentrations of Mn2+, Zn+2 partially inhibited the enzyme. It was determined that high concentrations of ß-Merkaptoethanol, EDTA, Ascorbic Acid and SDS inhibited the enzyme.Effects of 100 ppm, 10 ppm, 1 ppm chloropyriphos-ethyl, methyl-parathion, dichlorvos, dimethoate, diazinon, methamidophos, ethyl-parathion and fenthion pesticides on enzyme activity were researched. This pesticides activated the enzyme.
Benzer Tezler
- Muş yöresinde ümitvar ceviz (juglans regia L. ) tiplerinin belirlenmesi üzerinde araştırmalar
Studies on determination of new promising walnut (juglans regia L. ) types grown in Muş plain
NAYİT AYKUT
Yüksek Lisans
Türkçe
2001
ZiraatYüzüncü Yıl ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF.DR. SEYİT MEHMET ŞEN
- Cevizde (Juglans regia L. ) bazı fenolik asitlerin ve bazı eser elementlerin tayini
Determination of some phenolic acids and trace elements in walnut (Juglans regia L.)
AYŞE ŞAP
- Adi cevizde (Juglans regia L.) 1+0 yaşlı üç farklı orijinin morfolojik özellikleri arasındaki farklılıklar
The differences among morphological characteristics of 1+0 year old seedli̇ngs of three different provenance of anatolia walnut (Juglans regia L.)
DİLEK GÜLEÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Ormancılık ve Orman MühendisliğiBartın ÜniversitesiOrman Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EROL KIRDAR
- Erciş ve Muradiye cevizlerinin (juglans regia L.) seleksiyon yolu ile ıslahı üzerinde araştırmalar
A Study on the selection of walnut (juglans regia L.) in Erciş and Muradiye
ZEHRA SEVAL TETİK
Yüksek Lisans
Türkçe
1998
ZiraatYüzüncü Yıl ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TURAN KARADENİZ
- Gevaş yöresi cevizlerinin (Juglans regia l.) seleksiyon yolu ile ıslahı üzerinde araştırmalar
Studies on the breeding of walnuts (Julgans regia l.) in Gevaş district by selection method
TARIK YARILGAÇ
Doktora
Türkçe
1997
ZiraatYüzüncü Yıl ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEYİT MEHMET ŞEN