Geri Dön

Gen metilasyonu inhibitörü desitabin'in meme kanseri tedavisindeki yerinin in vitro araştırılması

Investigation into the use of gene methylation inhibitor decitabine in breast cancer therapy in vitro

PDF İndir

  1. Tez No: 259700
  2. Yazar: FERDA ARI
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. EGEMEN DERE
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Tıbbi Biyoloji, Biology, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Meme neoplazmları, Breast neoplasms
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Uludağ Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Demetile edici bir ajan olan desitabin'in epigenetik olarak susturulmuş genlerin tekrar aktifleştirilmesini sağlayarak apoptozisi artırdığı gösterilmiştir. Bu nedenle, desitabinin standart kemoterapiyle sinerjistik etkileşimi yeni bir tedavi modalitesi olabilir. Bu çalışmada, klasik FEC tedavisi (5-florourasil+Epirubisin+4-Hidroksisiklofosfamid) ile desitabin kombinasyonunun meme kanserinde yeni bir tedavi yaklaşımı olup olamayacağı araştırılmıştır.Desitabin ve FEC ile kombinasyonu, östrojen reseptörü negatif (MDA-MB-231) ve pozitif (MCF-7) meme kanseri hücre soyları üzerinde test edildi. uPA, PAI-1 (metastaz genleri), DAPK, TMS1 (apoptozis-indükleyici genler), MGMT (DNA onarım geni) genleri ve LINE-1 (genel metilasyon belirteci) dizisinde metilasyon seviyelerindeki değişiklikler metilasyon spesifik ?real-time PCR (methylight)? ile analiz edildi. Tüm tedavilerin sitotoksik etkileri MTT ve ATP canlılık testleri, apoptozis indükleyici etki ise M30-antijen testi ile belirlendi.Desitabinin, MCF-7 hücrelerinde apoptozisi arttırarak büyüme baskılayıcı etki göstermesine rağmen, MDA-MB-231 hücrelerini etkilemediği gözlenmiştir. Bununla birlikte kombinasyon tedavisinden (%100 TDC FEC+10µM desitabin) sonra her iki hücre soyunda LINE-1 metilasyon seviyesinde belirlenen anlamlı azalma sonucu genomdaki genel metilasyon seviyesinin azaldığı belirlendi (p<0.05). Her iki hücre soyunda desitabin (10µM) ve kombinasyon tedavisinden sonra DAPK gen promotör metilasyon seviyesinde azalma belirlendi. Ayrıca MDA-MB-231 hücrelerinde kombinasyon tedavisi sonucunda TMS1 gen promotör metilasyonunda anlamlı azalmalar gözlendi (p<0.05). Bu sonuçlara rağmen bu tedavilerin sadece MCF-7 hücrelerinde apoptozisi indüklediği M30 antijen testiyle belirlendi. Ayrıca MCF-7 hücrelerinde desitabin ve kombinasyon tedavisi sonucunda uPA ve PAI-1 gen promotör metilasyon seviyelerinde anlamlı azalma belirlendi. Bu da bu hücrelerde metastaz yapabilme yeteneğinin değişebileceğini göstermektedir.Sonuç olarak, standart kemoterapi ile demetile edici ajan kombinasyonlarının apoptozis ile ilişkili genlerin aktifleşmesini sağlayarak meme kanseri tedavisinin etkinliğini arttırabileceği düşünülmüştür. Fakat diğer taraftan metastaz genlerindeki aktifleşme, bu tedavilerin tümör tipine göre ve dikkatle uygulanması gerektiğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Decitabine as a demethylating agent may act synergistically with standard chemotherapy regimens to restore apoptosis by upregulation of epigenetically silenced genes. In this study, we investigated whether or not the combination of classical FEC treatment (5-FU+Epirubicine+4-Hydroxyclophosphamide) with decitabine might be a novel therapy option in breast cancer.The effect of decitabine and its combination with FEC has been tested on estrogen receptor negative (MDA-MB-231) and estrogen receptor positive (MCF-7) breast cancer cell lines. The changes in the methylation status of uPA, PAI-1 (metastasis promoter), DAPK, TMS1 (apoptosis-inducer) MGMT (DNA repair) genes and LINE-1 (global methylation marker) have been analyzed by methylation specific realtime PCR (methylight) after the application of decitabine, FEC and their combination treatment. Anti-growth effects of treatments were assayed by the MTT assay and the ATP assay; induction of apoptosis by the M30 antigen assay.It is shown that decitabine had anti-growth effect only on MCF-7 cells by induction of apoptosis but had no effect on MDA-MB-231 cells. However, LINE-1 methylation status significantly decreased after combination treatment (%100 TDC FEC+10µM decitabine) (p<0.05) which show that whole genom methylation decreased in both cell lines. The methylation ratio of DAPK promoter was significantly decreased after decitabine (10µM) and combination regimens in both cell line. In MDA-MB-231 cells, methylation of the TMS1 gene promoter was significantly reduced by combination treatment (p<0.05). Although these results, it?s found that apoptosis only induced in MCF-7 cell lines by M30 antigen test. In addition methylation of the uPA and PAI-1 promoter was significantly reduced by treatment with decitabine or the combination treatment in MCF-7 (p<0.05). This shows that the ability of metastasis may change in these cells.In conclusion, combination of standard chemotherapy with the combination of demethylating agents may influence therapy outcome by upregulation of apoptosis relevant genes in breast cancer therapy. But reactivation of metastasis genes shows that these therapies have to be used carefully according to tumor types.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    611445

    Platine dirençli over kanseri tedavisine yönelik nanopartiküler ilaç taşıyıcı sistemlerin geliştirilmesi ve değerlendirilmesi

    Development and evaluation of nanoparticulate drug delivery systems for platinum resistant ovarian cancer therapy

    ÖZGE EŞİM

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CANAN HASÇİÇEK

  2. Tez No

    492766

    Mide kanserinde vincristine uygulamasının miRNA gen metilasyonlarına etkisi

    The effect of vincristine on miRNA genes methylation in gastric cancer

    FEYZA NUR ARGÜÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyolojiHaliç Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MELİHA BURCU IRMAK YAZICIOĞLU

  3. Tez No

    730795

    Eksozomal inhibitörlerin epigenetik regülasyondaki rolü

    The role of exosomal inhibitors in epigenetic regülation

    ŞEYMA GÜL DURGUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    GenetikAfyonkarahisar Sağlık Bilimleri Üniversitesi

    Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NURAY VAROL

  4. Tez No

    590258

    Çeşitli hücre hatlarında Silimarinin epigenetik etkisinin değerlendirilmesi

    Evaluation of epigenetic effect of Silymarin in various cell lines

    YEŞİM KORKMAZ KASAP

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Tıbbi BiyolojiBaşkent Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERKAN YURTCU

  5. Tez No

    730195

    Investigation of the effect of valproic acid, an hdac inhibitor, on the relationship between oxidative stress and autophagy in human eosinophil

    İnsan eosinofillerinde valproik asit ile oluşturulan oksidatif stres ve otofaji sonrası bağışık yanıtların incelenmesi

    GÖKSU ÜZEL TURAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    DOÇ. DR. CEREN ÇIRACI

Geri Dön