Sıçanlarda oluşturulan deneysel ince barsak iskemi-reperfüzyon modelinde obestatinin olası anti-inflamatuar etkisi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 247736
- Danışmanlar: PROF. DR. CUMHUR ŞEVKET YEĞEN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Genel Cerrahi, General Surgery
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2009
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Obestatin ve ghrelin, çoğunlukla mide tarafından salgılanan, aynı gendensentezlenen fakat pek çok fizyolojik olayda birbirine zıt etkiler gösteren iki hormondur.Ghrelin, gastrik ve miyokardial iskemi-reperfüzyon gibi pek çok inflamatuar modeldeanti-inflamatuar etkinlik göstermiştir. Fakat obestatinin inflamasyon üzerindekietkilerini gösteren bir çalışma mevcut değildir.Amaç: Sıçanlarda oluşturulan deneysel ince barsak İ/R modelinde ghrelin veobestatinin olası anti-inflamatuar etkinliklerinin değerlendirilmesi.Gereç ve yöntem: Sprague Dawley sıçanların (n=48) süperior mezenterikarteri mikrovasküler klemple 60 dakika boyunca oklüde edildi. Sham grubuna (n=8)yalnız laparotomi yapıldı. Altmış dakika iskemi sonrasında klemp kaldırıldı veobestatin 100 ?g/kg, ghrelin 10 ng/kg, ya da serum fizyolojik inferior vena cava'ya (iv)injekte edildi. 90 dakika reperfüzyon sağlandı. Sıçanların bir grubuna İ/R'dan 3 günönce stereotaksik yöntemle intraserebroventriküler (isv) kateter yerleştirildi.Reperfüzyon süresi başında isv kateterinden obestatin 20 ?g/rat, ghrelin 2 ng/sıçanya da 4 ?l serum fizyolojik verildi. Doksan dakikalık reperfüzyon süresi sonundaakciğer ve ince barsak doku örnekleri alındı. İnflame dokuda PMNL infiltrasyonunudeğerlendirmek için MPO aktivitesi ölçüldü. Lipit peroksidasyonu miktarını ölçmek içinMDA düzeyi bakıldı. Dokulardaki antioksidan düzeyini ölçmek için GSH seviyesiölçüldü. Reaktif oksijen türleri miktarını değerlendirmek için luminol ve lusigeninaracılı kemilüminesan yöntemi kullanıldı. Apoptozu değerlendirmek için DNAfragmantasyonuna bakıldı. Işık, tarama ve geçirimli elektron mikroskopisindehistolojik değerlendirme yapıldı. Ayrıca dokulardaki kollajen miktarı ve NF-?B seviyesiölçüldü. Kan örneklerinde ELİSA yöntemi ile İL-10, İL-6 ve İL-1ß düzeyleri ölçüldü.Doku yaş ağırlıkları doku ödemini ve vasküler geçirgenliği değerlendirmek üzereölçüldü.Bulgular: İ/R grubunda ince barsak ve akciğer dokusunda MPO ve MDAdüzeyleri önemli oranda arttı ve GSH düzeyi azaldı (p<0,01-0,001). İki peptid her ikiuygulama yolu ile verildiğinde MPO ve MDA düzeyi azaldı ve GSH düzeyi arttıiv(p<0,05-0,001). İnce barsak dokusunda İ/R grubunda artan fragmante DNA seviyesi,her iki peptidin iv ve isv yolla uygulanmasından sonra azaldı (p<0,05-0,01). Fakatakciğer dokusunda DNA fragmantasyonu oranında tedavi grupları arasında önemlibir değişiklik meydana gelmedi. SF tedavisi uygulanmış İ/R grubunda sham grubunagöre kemilüminesan yöntemi ile ölçülen doku ROT miktarı arttı (p<0,05). İv ghrelin(p<0,05), iv obestatin (p<0,05) ve isv ghrelin (p<0,01) ince barsak dokusundaki ROTmiktarını azalttı. Fakat akciğer dokusundaki ROT miktarında tedavi grupları arasındaanlamlı bir değişiklik olmadı. İ/R grubunda ince barsak dokusunda ciddi mukozalhasar, düzleşmiş lamina propria, masif inflamatuar hücre infiltrasyonu ile birlikteyüksek hasar skorları (p< 0,001) tespit edildi. İ/R grubunda akciğer dokusunda ciddialveolar hasar, intestisyel ödem, ciddi vasküler konjesyon ve inflamatuar hücreinfiltrasyonu görüldü (p<0,001). İsv ve iv yolla uygulanan obestatin ve ghrelin, hemakciğer hem de ince barsak dokusunda hasar skorlarını önemli derecede azalttı(p<0,05-0,001). Tedavi gruplarında ince barsak dokusunda NF-?B mRNA düzeyiazaldı (p<0,05-0,01). Akciğer dokusunda ise tedavi gruplarında NF-?B mRNA düzeyiazalmakla birlikte istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Doku kollajen miktarı İ/Rgrubunda anlamlı olarak arttı (p<0,001). Hem iv hem isv yolla uygulanan bu iki peptiddoku kollagen miktarını her iki dokuda da azalttı (p<0,01-0,001). Serum İL-1ß düzeyitedavi gruplarında anlamlı olarak azaldı (p<0,05-0,01-0,001). İl-6 ve İL-10 düzeyleritedavi gruplarına azalmakla birlikte istatistiksel olarak anlamlı değildi. Tüm tedavigruplarında ince barsak ve akciğer dokusundaki ödem, SF tedavisi uygulanan İ/Rgrubuna göre önemli oranda azaldı (p<0,05-0,01-0,001).Sonuç:Bu çalışmada santral ve periferik yolla uygulanan obestatin veghrelinin, oluşturulan ince barsak İ/R modelinde, akciğer ve ince barsak dokusunuoksidatif hasara karşı koruyucu etki gösterdiği ilk kez gösterilmiştir. Bu koruyucu etkiher iki peptidin PMNL infiltrasyonunu azaltması, reaktif oksijen türevi üretiminiengellemesi, muhtemel reaktif oksijen türevi süpürücü etkinlik göstermesi, NF-?BmRNA düzeyini, proinflamatuar sitokin düzeyini ve vasküler permeabiliteyi azaltması,anti-fibrotik, anti-apoptotik ve anti-inflamatuar etkinlik göstermesi nedeni ilegerçekleşti.
Özet (Çeviri)
Obestatin and ghrelin, predominantly produced by the stomach, are derived from thesame gene, but have opposing actions in many physiological processes. Ghrelinexerts protective effects in several inflammatory models, such as gastric ormyocardial ischemia-reperfusion (IR) injury, but the role of obestatin in inflammationhas not been studied.Aim: The potential protective effects of ghrelin and obestatin in intestinal I/Rwere elucidated.Materials and Methods: Intestinal I/R was induced in Sprague Dawley rats(n=48) by placing a microvascular clamp across superior mesenteric artery for 60minutes, while the sham group underwent only laparotomy (n=8). On release of theclamp, the animals were injected intravenously (iv) with either obestatin (100 ?g/kg),ghrelin (10 ng/kg) or saline through vena cava at the beginning of 90-min reperfusionperiod. In a group of rats that were fitted stereotaxically with cerebroventricularcannulas 3 days before I/R, obestatin (20 ?g/rat) or ghrelin (2 ng/rat) or saline wasadministered intracerebroventricularly (icv) at the initiation of reperfusion. At the endof the reperfusion period, intestinal and lung samples were removed for themeasurement of tissue MPO activity (to estimate tissue PMN accumulation in theinflamed tissues), malondialdehyde (MDA; an index of lipid peroxidation) andglutathione (GSH, an antioxidant) levels. Additional intestinal and lung samples wereremoved to assess the formation of reactive oxygen species by luminol- andlucigenin-enhanced chemiluminescence (CL) method. DNA fragmentation in theintestinal mucosa and lung tissue were analyzed as an indicator of apoptosis. Forhistopathological analysis tissues were examined under light, scanning andtransmission electron-microscopy. Tissue collagen content and NF-?B levels alsowere measured. Blood was withdrawn and serum IL-10, IL-6 and İL-1ß levels weremeasured by ELISA as anti- and pro-inflammatory cytokines. Tissue weights werealso meassured to asses tissue edema and vascular permeability.Results: In saline-treated I/R group tissue MPO and MDA levels increasedand GSH level decreased significantly in lung and intestinal tissue (p<0.01-.0.001).Icv and iv administration of both peptides decreased MDA and MPO levels andviincreased GSH levels (p<0.05-0.001) in both tissue. Increased DNA fragmentation insaline-treated groups was reduced by icv and iv administration of both peptides(p<0.05-0.01) in theintestinal tissue, but there was no change in the lung. Asexpected, in saline-treated I/R groups CL levels were increased when compared tosham group (p<0.05), while iv ghrelin (p<0.05) and obestatin (p<0.05), as well as icvghrelin (p<0.01) depressed the CL levels in intestinal tissue. But there was nochange in CL levels of lung tissue by both given by either routh. In saline-treated I/Rgroups, high damage scores (p<0.001) due to severe mucosal degeneration,denuded lamina propria and extensive inflammatory cell infiltration were observed inintestines. In lung tissue, saline-treated I/R group showed massive alveolar damageand infiltration of inflammatory cells with severe interstitial edema and vascularcongestion. When ghrelin was administered icv or iv, the damage scores weresignificantly reduced in intestinal and lung tissues (p<0.05-0.001). Likewise, obestatinreduced the damage scores when administered by either route (p<0.05-0.001). Inintestinal tissue, NF-?B mRNA levels were reduced by icv ghrelin and iv obestatinsignificantly (p<0.05-0.01). In lung tissue, there was a small decline in NF-?B mRNAlevels in treatment groups but this was not statistically significant. Increased tissuecollagen content in saline-treated I/R groups was reduced significantly by icv and ivadministration of both peptides in lung and intestinal tissue (p<0.01-0.001). Elevatedserum IL-1ß levels in saline-treated İ/R were measured, while obestatin and ghrelinreduced the serum IL-1ß levels when administered by either route (p<0.05-0.001).There was reduced serum IL-10 and IL-6 levels in treatment groups but thesechanges were not statistically significant. Edema in lung and intestinal tissues wasreduced significantly in all treatment groups (p<0.05-0.01-0.001).Conclusion: The present data provide for the first time that both the centraland peripheral administration of obestatin and ghrelin exert potent protective effectson I/R-induced oxidative injury of the intestinal and pulmonary tissues by suppressingthe accumulation of neutrophils, inhibiting the generation of oxygen-derived freeradicals, reducing tissue NF-?B mRNA and serum proinflammatory cytokine levelsand by reducing vascular permeability through their anti-fibrotic, anti-apoptotic andanti-inflammatory properties.
Benzer Tezler
- Diyabetus mellitus'da gözlenen mikrovasküler komplikasyonların prostaglandinler ile olan ilişkisi
The Relation of microvaskular complications observed in diabetes mellitus with prostoglandins
CANAN NEBİGİL
Doktora
Türkçe
1985
Eczacılık ve FarmakolojiCumhuriyet ÜniversitesiFarmakoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. YUSUF SARIOĞLU
- Atherosklerotik kalp hastalıklarında risk faktörleri
Risk factors in the coronary artery disease
MURAT SUHER
- Acil yardım ve tedavi hastanelerinin idari mali ve teknik yönden planlaması
Başlık çevirisi yok
SERVET OKUYUCU
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
HastanelerGazi ÜniversitesiKazalarda Acil Yardım ve Rehabilitasyon Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HİKMET PEKCAN
- Toprak ve tarım reformu uygulamasında öncelikli köylerin tesbitine ilişkin bir yöntem uygulaması
Başlık çevirisi yok
SABİR ATASEVER