Geri Dön

Aktivasyon temeline dayalı amperometrik biyosensör sistemleri geliştirilmesi ve uygulamaları

Developing activation based amperometric biosensor systems and applications

PDF İndir

  1. Tez No: 202083
  2. Yazar: PINAR AKBAYIRLI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. EROL AKYILMAZ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Aktivasyon temelli biyosensör, katalaz, askorbat oksidaz, glukoz, bakır, Activation based biosensor, catalase, ascorbate oxidase, glucose, copper
  7. Yıl: 2007
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu tezde, aktivasyon temeline dayalı olarak glukoz tayini için katalaz ve bakır tayini içinde askorbat oksidaz temelli biyosensörler geli?tirildi. Her iki biyosensör için belirtilen enzimler immobilizasyon materyali olarak jelatin ile karı?tırılarak elde edilen enzim-jelatin karı?ımları çözünmü? oksijen probu üzerine yayıldı ve glutaraldehit ile çapraz bağlandı. Ölçümlerin temel prensibi enzimatik reaksiyonlar uyarınca aktivatör etkisi gösteren glukoz ve bakır konsantrasyonlarıyla orantılı olarak tüketilen oksijen miktarının farklanmasının belirlenmesidir. Bu prensipten yola çıkarak tüketilen oksijen miktarındaki artı?ın glukoz ve bakır konsantrasyonlarıyla doğru olarak deği?tiği standart grafikler yardımıyla sonuçlara ula?ılmı?tır. Hazırlanan biyosensörler için öncelikle biyoaktif tabaka bile?enlerinin optimizasyonları gerçekle?tirildi. Optimizasyon çalı?maları sonucunda katalaz biyosensörü için en uygun enzim miktarı, jelatin miktarı ve glutaraldehit yüzdesi sırasıyla; 662 U/cm2, 5,9 mg jelatin/cm2 ve %2,5, askorbat oksidaz biyosensörü için ise sırasıyla; ; 6,7 mg/cm2 homojenat, 5,9 mg jelatin/cm2 ve %2,5 olduğu saptandı. Çalı?ma ko?ullarının optimizasyonu denemeleri sonucunda katalaz biyosensörü için çalı?ma tamponunun pH:7,0, 50mM?lık fosfat tamponu olmasına ve ölçümlerin 35oC sıcaklıkta gerçekle?tirilmesine, askorbat oksidaz biyosensörü için ise çalı?ma tamponunun pH: 7,5, 50mM Tris-HCl tamponu olmasına ve ölçümlerin 35oC sıcaklıkta gerçekle?mesine karar verildi. Hazırlanan biyosensörlerin karakterizasyon çalı?malarında, katalaz biyosensörü ile glukoz için 0,5-5,0 ?M konsantrasyon aralığında, askorbat oksidaz biyosensörü ile bakır için yine 1,0-5,0 ?M konsantrasyon aralığında doğrusal sonuçlar alınabildiği belirlendi. Geli?tirilen biyosensörlerin tekrarlanabilirliğine yönelik yapılan çalı?malarda; katalaz biyosensörü için 3 ?M glukoz standardı ve 1mM H2O2 varlığında (n=8) ile ortalama değer X=3.05 ? M, standart sapma, S.S = ? 0.08 ve varyasyon katsayısı V.K = % 2,64, askorbat oksidaz biyosensörü için ise 2,5 ?M bakır standardı ve 15 ?M L-askorbik asit standardı (n=8) ile ortalama değer X=2.44 M, standart sapma, S.S= 0.018 ve varyasyon katsayısı, V.K= %0.72 olarak bulundu. Ayrıca biyosensörlerin operasyonel kararlılıkları, depo kararlılıkları , bazı maddelerin aktivasyon etkileri gibi parametreleri belirlendi. Farklı kan örneklerinde glukoz, farklı ilaç örneklerinde ise bakır tayinleri ve analitik parametreler belirlendi.

Özet (Çeviri)

In this thesis, activation based amperometric biosensor systems were developed. Catalase based biosensor for glucose determination and ascorbate oxidase based biosensor for copper determination were prepared. In order to prepare biosensors, enzymes mixed with immobilization material gelatin and the crosslinked with glutaraldehyde after fixed on pretreated teflon membrane. The principle of the measurements based on the determination of the differences at consumed oxygen levels related to concentration of glucose and copper ions that activated the enzymes. Determinations were carried out by standart curves which were obtained by the measurements of increase in the consumed oxygen level related to glucose and copper concentration. Firstly, the optimum concentration of the bioactive layer components were established for both biosensors. In the optimization studies the most suitable enzyme, gelatine amounts and glutaraldehyde ratio were determined as 662 U/cm2, 5.9 mg gelatin/cm2 and 2.5 %, for catalase biosensor and 6,7 mg/cm2 homogenat, 5.9 mg gelatin/cm2 and 2.5 % for ascorbate oxidase biosensor respectively. For catalase biosensor pH:7.0, 50mM phosphate buffer and 35oC, for ascorbate oxidase biosensor pH: 7.5, 50mM Tris-HCl buffer and 35oC were established as providing the optimum working conditions. In the characterization studies, a linearity in the glucose concenration range 0.5-5.0 ?M was obtained with catalase biosensor and a linearity in the copper concentraion range 1.0-5.0 ?M was obtained with ascorbate oxidase biosensor. The repeatability studies (n=8) revealed that for 3 ?M glucose and 1mM H2O2, the avarege value ( x ) was 3.05 ? M, standart deviation (SD) was ? 0.08 and variation coefficient (CV) was 2.64 % for catalase biosensor and the repeatability studies (n=8) revealed that for 2.5 M copper and 15 M L-ascorbic acid , the avarege value ( x ) was 2.44 M, standart deviation (SD) was 0.018 and variation coefficient (CV) was 0.72 % for ascorbate oxidase biosensor. Besides, operational and storage stability of both biosensors were investigated. In addition, glucose concentration of different blood samples, copper concentration of different medicine samples and analytical parameters were determined.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    200864

    Katı oksit yakıt hücreli enerji üretim sistemlerinin alternatif kriterlere göre performans analizi

    Performance analysis of solid oxide fuel cell based energy generation systems with alternative criteria

    ALİ VOLKAN AKKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    Makine MühendisliğiYıldız Teknik Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. BAHRİ ŞAHİN

  2. Tez No

    517625

    Cross-dataset person re-identification

    Çapraz veri küme kişiyi yeniden tanıma

    ANIL GENÇ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİstanbul Teknik Üniversitesi

    Bilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HAZIM KEMAL EKENEL

  3. Tez No

    322649

    Canine parvovirus'e ait antijenik özellikli sentetik peptidlerin sentezi ve biyokonjugatlarının geliştirilmesi

    Synthesis of antigenic synthetic peptide of Canine parvovirus and development of bioconjugates

    SERAP ACAR DERMAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ZEYNEP MUSTAFAEVA AKDESTE

  4. Tez No

    478480

    Protein C tayinine yönelik yüzey plazmon rezonans sensörlerin hazırlanması

    Preparation of surface plasmon resonance sensors for detection of protein C

    SEDA KOYUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HANDAN YAVUZ ALAGÖZ

  5. Tez No

    116090

    Study of ring opening polymerization by using metal xanthates

    Metal ksentatlar kullanılarak yapılan halka açılma polimerizasyonlarının incelenmesi

    ÖZLEM SOYSAL

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2001

    KimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KEMAL YÜRÜK

Geri Dön