İnsan sperminde kromozomal yapı anomalileri ile hücresel olgunlaşmanın ilişkisi
The relationship between human sperm structural chromosomal anomalies and sperm cellular maturation
- Tez No: 194414
- Danışmanlar: PROF.DR. RAMAZAN DEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Sperm matüritesi, fertilizasyon, hyalüronik asit spermseleksiyonu, ICSI, kromozomal anomaliler, Human sperm maturity, fertilization, Hyaluronic acid sperm selection, ICSI, chromosomal aberrations
- Yıl: 2005
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZETSperm olgunlaşması ve fonksiyonunun biyokimyasal belirteçleri günümüzdeönemli bir araştırma konusudur. Sadece olgun spermlerin Hyalüronik Asit'e (HA)bağlanabildikleri önceden ortaya konmuştur. Böylece, klinik uygulama amacıyla,HA'e bağlanma ile olgun ve normal kromozomal yapılı sperm seçimi, ntraSitoplazmik Sperm njeksiyonu (ICSI) için güvenli ve etkili bir çözüm sağlayabilir.Spermatogenetik kusurların, insan spermatozoasında karyotipik değişikliklere veyapısal kromozom sapmalarına sebep olduğu bilinmektedir. Fertilizasyon yeteneği vesperm konsantrasyonu düşük olan erkeklerde, anormal karyotipli sperm görülmesıklığı artar ve bu erkekler genellikle ICSI ile tedavi olan kişilerdir. Dolayısıyla buçalışmada, spermin hyalüronik asite bağlanabilme ya da bağlanmama özelliğinedayanarak, farklı yöntemlerle spermin kromatin yapısı, hücresel olgunluğu vekromozomal yapısı arasındaki potansiyel ilişkinin araştırılması amaçlanmıştır.Çalışmada, normozoospermik ve oligozoospermik örneklerden spermlerhazırlanarak ve gerek seçilmemiş gerekse HA ile seçilmiş spermatozoalarda anilinmavisi boyaması ile kromatin, CK-B immünoflorasan boyaması ile hücreselmatürasyon değerlendirildi. Transmisyon Elektron Mikroskobu (TEM) tekniğikullanılarak semen, HA'e bağlanan ve HA'e bağlanmayan spermlerin üç boyutluyapı değişiklikleri incelenerek, bağlanan spermlerin ince yapısı ile hücre membranıbütünlüğü ilişkisi kıyaslandı. Ayrıca hamster ya da fare ovositleri, metafazaşamasında bulunan insan spermine ait kromozomların değerlendirilmesi içinkullanıldı.Uygulanan farklı teknikler sonucu, HA'e bağlanma yeteneği ile spermolgunlaşması arasında güçlü bir ilişkinin olduğunu görüldü. Bağlanan sperm matürtipte kromatin yapısına sahipken sitoplazmik tutulum göstermedi. Elde ettiğimizveriler, spermin plazma membranında yer alan HA bağlayıcıları vasıtasıylahyalüronik asite bağlanma özelliğinin, tamamlanmış bir spermiyogenetikolgunlaşmayı ifade ettiği kanaatini vermektedir.Sonuç olarak, spermiyumun HA'e bağlanma kapasitesi ile sitoplazmiktutulum (CK-B) düzeyi ve olgunlaşması, dolayısıyla kromatin organizasyonuarasında bir ilişki vardır. Spermiyuma ait RNA'larla ilgili yeni bilgilerden yolaçıkarak, fertilizasyondaki kompleks mekanizmaları aydınlatabilmek için molekülerdüzeyde araştırmalar yapılması gerekmektedir.
Özet (Çeviri)
ABSTRACTBiochemical markers of sperm maturity and function are important researchsubjects in the last years. It has been concluded that only mature sperm are able tobind to Hyaluronic acid (HA). Thus, HA sperm selection provides a new, safe, andefficient solution for selection of mature, chromosomally normal sperm for clinicalapplication in assisted reproduction. It is well known that spermatogenetic defectsmay also cause structural chromosomal aberrations, or karyotypic changes in humanspermatozoa. Indeed, in men with diminished sperm concentrations and loweredfertility, the frequencies of sperm with abnormal karyotypes are increased and thesemen are candidates for Intra Cytoplasmic Sperm Injection (ICSI). Therefore, in thepresent study it has been purposed to investigate the potential relationship betweenchromatin maturity, cellular immaturity and chromosomal structure in human spermby using different techniques based on their ability to bind HA.In the present study, after preparation of samples originated in oligospermicand normospermic men, the sperm chromatin maturity and cellular maturity wereassessed by aniline blue staining and CK-B immunofluoresance stainingrespectively, in HA-bound and unbound sperm fractions. Three dimensionalstructural changes were examined by Transmission Electron Microscopy (TEM), andultrastructural properties and membrane integrity were compared in semen, HA-bound or -unbound sperm fractions. On the other hand, hamster or mouse oocyteswere used to see human sperm chromosomes at metaphase stage.It has been shown that there was a strong relationship between spermmaturity and the ability of HA-binding after application of different techniques. HA-bound sperm showed no cytoplasmic retention having mature chromatin structure.Our data supported the idea of sperm binding to HA via the plasma membranereceptors represents unequivocal evidence of completed spermiogenetic maturation.As a result, HA-binding capacity and the extent of cytoplasmic retention inindividual sperm are related to each other and also to chromatin maturity. Furtherinvestigations needs to be done on molecular level based on the recent knowledge onspermatozoal mRNA to highlight the complex mechanisms about fertilization.
Benzer Tezler
- İnsan sperminde kromozomal anöploidiler ve morfolojik özellikler arasında ilişkilerin morfometrik ve floresan in situ hibridizasyon (FISH) yöntemleriyle araştırılması
Assessment of the relatonship between chromosomal aneuploidies and morphology of human sperm by morphometry and fluorescent in situ hybridization
ÇİLER ÇELİK ÖZENCİ
Doktora
Türkçe
2003
MorfolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. RAMAZAN DEMİR
PROF. DR. GABOR HUSZAR
- Normal ve translokasyon taşıyıcısı erkeklerin spermiumlarında FISH ile kromozom analizi
FISH analysis in the sperm chromosomes of normal and translocation carrier males
BEYHAN DURAK
Doktora
Türkçe
1998
Tıbbi BiyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURETTİN BAŞARAN
- Peroksinitritin sperm ATPaz aktivitesi üzerine etkisi
Effect of peroxynitrit on sperm ATPase activity
GÜLŞEN AKTAN
- İnsan spermindeki adezyon moleküllerinden beta 1 alfa 6 integrin molekülünün sperm sayı ve morfolojisine göre dağılımının immünohistokimyasal olarak değerlendirilmesi
Expression of adhesion molecules; beta 1 alpha 6 integrins according to concentration and morphology of human spermatozoa
SEVİNÇ EGE
Doktora
Türkçe
2000
MorfolojiGazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DENİZ ERDOĞAN
- Sperm kriyoprezervasyonu sonrasında apoptozisin değerlendirilmesi
Evaluation of apoptosis after sperm cryopreservatıon
FULYA AYDINER
Yüksek Lisans
Türkçe
2008
Histoloji ve EmbriyolojiDokuz Eylül ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. KAZIM TUĞYAN