Midye (Mytilus galloprovincialis L.) Beta-D-galaktozidaz izoenzimlerinin elde edilmesi ve bazı özelliklerinin incelenmesi
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 18119
- Danışmanlar: PROF.DR. İNCİ KUŞÇU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Beta galaktosidaz, Enzimler, Midyeler, Beta galactosidase, Enzymes, Mussels
- Yıl: 1990
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
- 36 - ÖZET Bu araştırmada Türkiye sahillerinde bulunan Mytilus gal- loprovincialis L.'m, f -D-galaktozidaz izoenzimleri elde edilip bazı özellikleri incelenerek, metabolizmasının bir bölümü aydınlatılmaya çalışılmıştır. Rumelikavağı deniz kı- yısmaan toplanan, midyelerin kabukları çıkarıldıktan sonra geriye kalan dokuları homogenize edilmiş; homo jenizat tan, ^-D-galaktoziaaz aktivitesi içeren kısım uygun amonyum sül fat konsantrasyonunda çöktürülerek, izoenzimleri karışım ha- linae içeren °/o 25 - % 50 amonyum sülfat kesiti elde edilmiş tir. Söz konusu kesitin hidroksilapatit kolondan pH sı 6.8 olan farklı molaritedeki fosfat tamponlarıyla elüsyonu so nucunda; 50 mM, 10C mH ve 200 mM tamponlarda toplanan ve sırasıyla Fn, Fo ve F* olarak adlandırılan elüatların f -D- galaktozidaz izoenzimlerini içerdiği saptanmıştır. Fn fraksiyonundaki iki izoenzimin karışım halinde oldu- ğu, Fp ve F, fraksiyonlarında ise birer izcenzim bulunduğu görülmüştür. Böylece, Mytilus galloprovincialis L. doku ho mo jenizatmın dört tane ^“-D-galaktozidaz izoenzimine sahip olaugu anlaşılmıştır. Bunlardan en yüksek spesifik aktivite- nin Fi de, en düşük spesifik aktivitenin Fj t e bulunduğu, F5 deki spesifik aktivitenin F-, fraksiyonundakine çok ya- km olduğu saptanmıştır. Her üç fraksiyonda bulunan f -D-galaktozidaz izoenzim- lerinin tümünün en yüksek aktiviteyi asid pH larda göster-- 37 - dikleri belirlenmiştir. F-^ fraksiyonuna ak i iki izoenzimin, pH 2.1 ve 4 olmak üzere, farklı optimum pH larmın bulunduğu; F2 ve F3 teki izoenzimlerin optimum pH larmın sırasıyla 1.5 ve 2 olduğu görülmüştür. F-, ete yer alan iki izoenzimin her ikisinin de en yüksek aktiviteyi 50°C de gösterdikleri, F ve F, teki izoenzimle rin sırasıyla 50°C ve 40°C de en yüksek aktiviteye sahip ol dukları anlaşılmıştır. F-, fraksiyonu için, iüi izoenzim karışımını içerdiğinden, Vmcı”ve K_ değerleri saptanmamıştır. F, fraksiyonunun en yük- sek reaksiyon hızı 4.11 umol 4-nitrofenol/dak. ve K değeri 19.9 mM olarak bulunmuştur. F, için V___ ve K değerleri sı- jj in 3.x izi rasıyla 13.33 umol 4-nitrofenol/dak. ve 15.9 mM dür. Bu bul gular F5 fraksiyonundaki izoenzimin substrata (4-nitrofenil- & -D-galaktopiranozid'e) karşı ilgisinin, F" dekine kıyasla, daha yüksek olduğunu göstermiştir. Sonuç olarak Mytilus galloprovincialis L. adlı midye tü rünün dört tane 0-D-galaktozidaz izoenzimini içerdiği sap tanmış; söz konusu izoenzimlerin, adı geçen midyenin gıda larında ve çeşitli doku hücrelerinde bulunan bileşiklerdeki a -D-galaktozid bağlarının hidrolizinden sorumlu oldukları ileri sürülmüştür.
Özet (Çeviri)
- 38 - SUMMARY In the present study ^-D-galactosidase isoenzymes were isolated from Kytilus galloprovincialis L., a mollusc spe cies existing in the coasts of Turkey, and some properties of the isoenzymes were examined in oraer to elucidate a part of the mollusc's metabolic functions. After removal of shells of the molluscs, collected from Rumelikavağı seabord, the remaining soft tissues were homogenized and F-D-galactosi~ dase isoenzymes were obtained from the tissue homogenizate in 25 % - 50 % ammonium sulphate concentration. Application of the mentioned ammonium sulphate fraction to hydroxylapa- tite column and elution by means of phosphate buffers of various molarities, each at pH 6.8, resulted in the exis- tance of f -D-galactosidase isozymic forms in 50 mM, 100 mM and 200 mM eluates, called F,, Fp and F3 fractions respectively. F, fraction contained a mixture of two isoenzymes, but each of fractions F? and F* possessed only one isoenzymic activity. Thereupon it was deduced that four isozymic forms of ft -D-galactosidase occured in Mytilus galloprovincialis L. tissue homogenizate. Among those fractionsjF-^ had the highest, F-z hact the lowest specific activities and the spe cific activity of F2 ^as very close to that of F-^ All the 8 -D-galactosidase isoenzymes exerted highest activities at acidic pH values. Two isoenzymes in F-^ had- 39 - different pH optima, one at pH 2.1 and the other at pH 4. Isoenzymes of Fp and F5 displayed maximum activities at pH 1.5 and 2 respectively. Two isoenzymes in F-, had a common optimum temperature, 50°C. The other two isoenzymic forms in Fp and F, exerted maximum activities at 50 C and 40°C respectively. The kinetic constants of F-, were not examined because the fraction was a mixture of two isoenzymes. V“”" and K max m values with 4-nitrophenyl- f -D-galactopyranoside for isoen zyme in Fp were 4.11 umol 4-nitrophenol/min. and 19.9 mM. Isozymic form of #-D-galactosidase in F, had a maximum re action rate of 13.33 umol 4-nitrophenol/min. and K value of 15.9 ffiM. These results indicated that isoenzyme in F-, had a higher affinity for its substrate rather than that of ^2 isoenzyme. It was deduced that Mytilus galloprovincialis L. possess ed four isozymic forms of f -D-galactosidase which v/ere con sidered to be responsible for the hydrolysis of ^-D-galac- toside linkages of compounds present both in nutrients and in various tissues of the mollusc.
Benzer Tezler
- Midye (Mytilus Galloprovincialis Lam.) hepatopankreas beta-D-galaktozidaz izoenzimlerinin kısmen saflaştırılması
Partial purification of mytilus galloprovincialis lam. hepatopancreas beta-D-galaktosidase
FATMA CEREN DİKMEN
- Midye (Mytilus galloprovincialis L.) hepatopankrası Alfa-D-Galaktozidaz`ının araştırılması
Studies on mollusc hepatopancreas Alfa-D-Galactosidase
S. BANU OKKAOĞLU
- Anadolu Kavağı yöresi midye türünde (Mytilus galloprovinoialis Lamarck, 1819) bazı ağır metal birikimlerinin belirlenmesi
Determination of some heavy metal bioaccumulation levels in mussel, Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819 from Anadolu Kavağı
SERVET ATAYETER
- 134Cs ve 241Am biyotekniğinin üç farklı organizma için incelenmesi kesikli zaman modeli ile yeni bir değerlendirme
Investigation of biokinetics of 134Cs and 241Am radionuclides in three different organisms and a new evaluation by using discrete time model
NURDAN GÜNGÖR
