Geri Dön

Karpuz (Critrullus lanatus (Thunb.) Matsun and Nakai)'da bitki rejenerasyonu ve Agrobacterium aracılığı ile transformasyon

Agrobacterium-Mediated transformation of watermelon (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun and Nakai) and plant regeneration

PDF İndir

  1. Tez No: 151753
  2. Yazar: FERAY ERDAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. KEMAL KOÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Ziraat, Agriculture
  6. Anahtar Kelimeler: Agrobacterium tumefaciens, (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun ve Nakai ), Bitki Regenerasyonu, Gen Transformasyonu, Bitki rejenerasyonu, Citrullus lanatus, Gen aktarımı, Karpuz, Agrobacterium tumefaciens, (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun and Nakai), Plant Regeneration, Gene Transformation n, Citrullus lanatus, Gene transfer, Watermelon
  7. Yıl: 2004
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Çukurova Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Bitki Koruma Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Karpuz bitkisinin (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun ve Nakai) kotiledon ve hipokotil bitki doku parçalan kullanılarak marker gen olarak kanamisine dayanıklılık (npt 27) ve |3-glukoronidaz (GUS) genlerini içeren Agrobacterium tumefaciens 'in pGA482GG plazmidini taşıyan EHA101 ırkı ile gen transferi yapılmıştır. İn vitro koşullarda karpuz tohumlarının çünlendirilmesi ile elde edilen bitkilerin kotiledon ve hipokotil parçalan farklı hormon konsantrasyonu ve kombinasyonlarını içeren MS ortamı üzerinde kültüre alınmış ve en iyi sürgün regenerasyonunun 2 mg/1 BAP+ 1 mg/1 ABA içeren MS ortamı üzerinde olduğu gözlenmiştir. En fazla sürgün regenerasyonu ortadan enine ikiye kesilen kotiledonlarrn yaprak sapma bağlanan kısımlardan elde edilmiştir. Elde edilen bitkilerin köklendirilmesinde en iyi sonuç 0,5 mg/1 İBA içeren MS ortamı üzerinde kültüre alman bitkilerde gözlenmiştir. Kültüre alındıktan yaklaşık 3 hafta sonra 10-12 cm uzunluğa ulaşan, kök oluşturan bitkiler, toprağa aktarılarak doğal koşullara adaptasyonlan sağlanmış ve çiçek oluşturduktan gözlemlenmiştir. Transformasyon için uygun ortam ve dokuların belirlenmesinden sonra A. tumefaciens ile transformasyon yapılmıştır. Kanamisin içeren ortamdan seçilen bitki doku parçalan histokimyasal GUS analizi ile test edilmiş ve dokularda meydana gelen mavi renk değişimi gözlenmiştir. Transformasyon yapılan dokulardan ve bu dokulardan regenere olan sürgünlerden DNA izolasyonlan yapılmış, npt II ve GUS genlerini belirlemek için PCR analizleri yapılmıştır. PCR ürünlerinin elektroforezi sonucunda npt II geni için 700 bp'lik, GUS geni için 660 bp'lik spesifik bantlar gözlenmiştir. Bu çalışma ile karpuz bitkisinde daha sonra yapılacak çalışmalar için bir regenerasyon sistemi ve tarımsal açıdan önemli olan diğer genlerin aktanlması için kullanılabilecek genetik transformasyon sistemi oluşturulmuştur.

Özet (Çeviri)

Cotyledon and hypocotyl segments of watermelon (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsun and Nakai ) were used for the transformation performed by the EHA101 strain of Agrobacterium tumefaciens harboring the binary vector pGA482GG carrying the marker genes the neomycin phosphotransferase II determining resistance to kanamycin and (3- glucoronidase (GUS). Cotyledon and hypocotyl segments of watermelon plants obtained in vitro conditions were cultivated on MS medium containing different concentrations, combinations of hormones, and the better shoot regeneration medium was observed on MS medium containing 2 mg/1 BAP + 1 mg/1 ABA. The maximum shoot regeneration was obtained from the proximal ends of cotyledon leaves that were cut transversely in to two halves. The best results were observed on the root formation taken by the obtained plants that grow in 0,5 mg/1 IB A MS medium. After 3 weeks later, the plant roots, which reach 10- 12cm heights, were transferred to the soil for adaptation to natural condition, and it was observed that these plants had flower. After determining the appropriate medium and the plant tissues for the transformation, this transformation was done by the Agrobacterium tumefaciens. Plant tissues selected in the MS medium containing kanamycin were tested by histological GUS assays and blue color staining was observed on the tissues. DNA was isolated from transgenic plant tissues and shoots regenerated from these transgenic plants. PCR were done to indicate transferred npt H and GUS genes. As results of the electroforeze of PCR products, 700 bp specific DNA bands of npt II and 660 bp specific DNA bands of GUS were observed. With this study, the regeneration system on watermelon for later studies and the gene transformation system for transforming gene in aspect of the agriculture were formed.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    179453

    Karpuz (Citrullus lanatus (thumb.) matsum. et naksi) rizosferinden Streptomyces bakterilerinin izolasyonu, teşhisi ve moleküler karakterizasyonu

    Isolation, identification and characterisation of streptomyces spp. isolated from rhizosfere soils watermelon (Citrullus lanatus (thumb.) matsum. et naksi)

    VEYSİ KIZMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    BiyolojiYüzüncü Yıl Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EKREM ATALAN

  2. Tez No

    10212

    Kavun (Cucumis melo var. inodorus ve reticulatus) ve karpuzda (Citrullus lanatus (thunb.) mansf) ışınlanmış polenle uyartılan in situ partenogenetik embriyolardan in vitro kültürü ile haploid bitki eldesi

    Başlık çevirisi yok

    NEBAHAT GÜRSÖZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1990

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KAZIM ABAK

  3. Tez No

    170270

    Diyarbakır ili kavun (Cucumis melo L.) ve karpuz (Citrullus lunatus Thunb.(Mansf.) ekiliş alanlarında tylenchida (nematoda) türleri üzerinde taksonomik araştırmalar

    Taxonomic studies on the of tylenchıda (nematoda) in muskmelon (Cucumus melo L.) and watermelon (Cıtrullus lunatus (Thunb.) Mansf.) cultivated areas in Diyarbakır province

    AYŞE NUR OSMANOĞLU TAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    ZiraatAnkara Üniversitesi

    Bitki Koruma Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. EMEL ÖKTEN

  4. Tez No

    182136

    Değişik meyveler ve bu meyvelerden yapılan reçellerde NDF(nötral deterjan lif), ADF (asit deterjan lif) ve hemiselüloz içeriğinin belirlenmesi

    NDF(neutrol detergent fiber), ADF (acid detergent fiber)and hemicellulose content of different fruits and their jams

    FERYAL ERBİLİR ÖZEL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    BiyolojiKahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. ÖZLEM ERDOĞRUL

  5. Tez No

    28694

    Karpuzda (Citrullus lanatus (Jhunb) Matsun and Nakai) Önçimlendirme (priming) uygulamalarının düşük sıcaklıklardaki çimlenme ve çıkış oranı ile süresi üzerine etkileri

    Başlık çevirisi yok

    BEDRİYE TORUN HERGÜNER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1993

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KAZIM ABAK

Geri Dön