Use of Triton X-114 aqueous two phase system for recovery of mushroom (Agaricus bisporus) polyphenoloxidase
Triton X-114 sulu iki-faz yönetiminin mantardan elde edilen Polifenoloksidaz'ın eldesi için kullanımı
- Tez No: 143189
- Danışmanlar: PROF. DR. UFUK BAKIR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya Mühendisliği, Chemical Engineering
- Anahtar Kelimeler: Aqueous Two Phase Separation, Polyphenoloxidase, Triton X-114, Thermoseparation, Purification
- Yıl: 2003
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Mantardan (Agaricus bisporus) elde edilen polifenoloksidaz (PPO) (EC 1.14.18.1), oktil fenol (etilenglikol) 7-8 eter (Triton X-114/TX-114) içeren sulu iki faz sistemi kullanılarak aynştınlmıştır. TX-1 14, suda sıcaklığa bağlı deterjanca zengin alt faz ile deterjanca fakir üst faz olarak sulu iki faz sistemi oluşturan anyonik bir deterjandır. Kritik misel derişimi (CMC) ve bulut noktası sırasıyla 0.17 mM ve 22°C'dir. Mantar PPO'ının TX-114 sulu iki faz sistemlerindeki ayrılma davranışı çalışılmıştır ve TX- 1 14 konsantrasyonu, ortamın iyonik gerilimi, pH, sıcaklık, ekstrakt hazırlanışı gibi parametrelerin PPO'nun ayrılmasmdaki etkileri çalışılmıştır. PPO genellikle deterjanca fakir üst faza ayrılırken, istenmeyen çoğu hidrofobik protein ve fenolikler gibi diğer moleküller deterjanca zengin alt faza ayrılmıştır. Enzim hazırlanışı sırasında iki kademeli ultrafiltrasyon uygulandığı zaman, TX-1 14 ile çalışılan tüm konsantrasyonlarda, enzimlerin tümünün üst fazda korunumu sağlanmıştır. Ayrıca, 8% TX-114 kullanıldığı zaman yaklaşık 5 kat saflaştırma elde edilmiştir. pH 7.0' de polivinilpolipirolidon (PVPP) kullanılarak saflaştırma 10 kat artmış ve %72 enzim geri kazanımı elde edilmiştir. Bununla beraber pH 6.0'da çalışıldığı zaman saflaştırma 15.5 kata ve geri kazanım %100'e yükselmiştir. Sodyum veya potasyum tuzlarım eklemek, PPO moleküllerinin deterjanca zengin alt faza ayrılmasına yol açmıştır. Son olarak, sulu iki faz sistemi oda sıcaklığında yapıldığında, enzim saflaştırma ve geri kazanımının yam sıra konsantre edilmiştir. Anahtar sözcükten İki Fazlı Sulu Sistem, Polifenoloksidaz, TX-114, Termal ayrılma, Saflaştırma.
Özet (Çeviri)
Mushroom (Agaricus bisporus) polyphenoloxidase (PPO) (EC 1.14.18.1) was isolated and purified using an aqueous two phase system composed of oetyl phenol (ethyleneglycol) 7-s ether (Triton X-l 14/TX-l 14). TX-114 is a non-ionic surfactant which thermoseparates in water and forms an aqueous two phase system with a surfactant-depleted top phase and a surfactant-enriched bottom phase. Critical micelle concentration (CMC) and cloud point of the surfactant are 0.17 mM and 22°C respectively. The partitioning behavior of mushroom PPO in water/TX-114 aqueous two-phase systems was studied and the effects of TX-114 concentration, ionic strength, pH, temperature and crude extract preparation on PPO partitioning were studied. PPO generally partitioned to the surfactant-depleted top phase; whereas many other hydrophobic proteins and molecules partitioned to the surfactant- enriched bottom phase. When two-step ultrafiltration was used as a pretreatment, complete enzyme recovery was achieved with all studied TX-114 concentrations. Moreover, about 5 fold purification was achieved by using 8% TX-114. The purification increased to 10 fold by using polyvinylpolypyrolidone (PVPP) at pH 7.0 with a recovery of 72%. However changing pH from 7.0 to 6.0 increased the purification factor and enzyme recovery to 15 fold and 100%, respectively. Addition of potassium or sodium salts caused PPO molecules to partition in the surfactant- enriched bottom phase. Finally, crude enzyme can be concentrated besides being purified and recovered by doing aqueous two-phase separation at room temperature.
Benzer Tezler
- Zonguldak bitümlü kömürünün köpük flotasyonu ile iyileştirilmesi
Beneficiation of Zonguldak bituminous coals by froth flotation
F. ÇİĞDEM ÇOLDUROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2002
Kimya MühendisliğiAnkara ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ZEKİ AKTAŞ
- Organik bileşiklerin farklı adsorbentlere adsorpsiyon davranışlarının incelenmesi
Investigation of adsorption behaviour of organic compounds on different adsorbents
UMUT DERYA TURSUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2002
Kimya MühendisliğiAnkara ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ZEKİ AKTAŞ
- Slurry tekniği ile eser elementlerin zenginleştirmesi ve atomik absorpsiyon spektrometrisi ile tayini
Preconcentration of trace elements by slurry technique and their determination by atomic absorption spectrometry
ASLI BAYSAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2005
Kimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN AKMAN
- Katı faz fermantasyon tekniği ile termotoleran Bacillus coagulanstan ekstraselüler lipaz enzimi üretimi
Production of lipase enzyme from thermotolerant Bacillus coagulans by solid-state fermentation technique
MEHMET HÜSEYİN ALKAN
- Çeşitli organik maddelerin klorürlü ortamda alüminyum korozyonu üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi
Inhibition effects of some organic substances on the corrosion of aluminum in chloride containing media
TİJEN TÜVÜR
Yüksek Lisans
Türkçe
2004
Kimya MühendisliğiGazi ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF.DR. MÜBECCEL ERGUN