Glutatyon tayinine yönelik biyosensör geliştirilmesi
Biosensor development for the determination of glutathione
- Tez No: 120368
- Danışmanlar: PROF.DR. ERHAN DİNÇKAYA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Askorbat oksidaz, glutatiyon tayini, GSH, GSSG, inhibitör biyosensörleri, Biyosensörler, Glütatyon tayini, İnhibitör, ascorbate oxidase, glutathione determination, GSH, GSSG, inhibitor biosensors, Biosensors, Glutatione determination, Inhibitor
- Yıl: 2002
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET GLUTATİYON TAYİNİNE YÖNELİK BİYOSENSÖR GELİŞTİRİLMESİ SEZGİNTÜRK,Mustafa Kemal Yüksek Lisans Tezi,Biyokimya Anabilim Dalı Tez Yöneticisi:Prof.Dr.Erhan DİNÇKAYA 79 sayfa Bu tezde,glutatiyon'un tayinine yönelik doku homojenatı temelli bir biyosensör geliştirildi.Biyolojik materyal olarak askorbat oksidaz içeren salatalık dokusu kullanıldı. Salatalık doku homojenatı,oksijen tayini amacıyla kullanılan çözünmüş oksijen probu yüzeyinde,glutaraldehit yardımıyla jelatin ile çapraz bağlanarak biyosensör hazırlandı. Ölçümlerin temel prensibi,enzimatik reaksiyon uyarınca L-askorbik asit konsantrasyonu ile orantılı olarak tüketilen oksijen miktarının ortama ilave edilen ve askorbat oksidaz'ın inhibitörü olan GSH (glutatiyon)konsantrasyonuyla orantılı olarak azalmasıdır. Tüketilen oksijen miktarındaki azalmanın GSH konsantrasyonuyla doğru orantılı olarak değiştiği standart grafikler yardımıyla sonuca ulaşıldı. Hazırlanan inhibitor biyosensörü için öncelikle optimum koşullar belirlendi. Optimizasyon çalışmaları sonunda en uygun salatalık dokusujelatin miktarı ve glutaraldehit yüzdesi sırasıyla ; 141,7 ul salatalık doku homojenatı/cm2, 7,1 mg jelatin/cm2 ve % 2,5 olarak bulundu. Yapılan optimizasyon çalışmaları sonucunda çalışma tamponunun pH 7,5,50 mM'lık fosfat tamponu olmasına ve ölçümlerin 35 °C sıcaklıkta gerçekleştirilmesine karar verildi.Karakterizasyon çalışmalarında,600 uM askorbik asit substrat olarak kullanıldığında,0,1-2 uM konsantrasyon aralığında GSH için doğrusal sonuçlar alınabildiği belirlendi. Geliştirilen biyosensörün tekrarlanabilirliğine yönelik yapılan çalışmalarda; 1,5 luM'lık glutatiyon standardı (n=7) ileortalama değer, x=l,517 uM,standart sapma,S.SM,72.10"5 ve varyasyon katsayısı, V.K=% 3,11 olarak bulundu. Ayrıca biyosensörün termal stabilite, depo kararlığı,inhibitör spesifikliği gibi parametreleri belirlendi.
Özet (Çeviri)
vn ÖZET BIOSENSOR DEVELOPMENT FOR THE DETERMINATION OF GLUTATHIONE SEZGİNTÜRK, Mustafa Kemal M.Sc in Biochemistry Supervisor: Prof.Dr.Erhan DİNÇKAYA 79 pages In this thesis, an amperometric biosensor based on tissue homogenate was developed for the determination of glutathione. Cucumber (Cucumis sativus L.) tissue homogenate was used as the biological material. The cucumber tissue homogenate was crosslinked with gelatine by using glutaraldehyde and fixed on pretreated teflon membrane. The principle of the measurements based on the determination of consumed oxygen level by the activity of ascorbate oxidase in biological material and decrease in the consumed oxygen level related to glutathione concentration injected reaction cell. Determinations were carried out by standard curves which were obtained by the measurement of decrease in the consumed oxygen level related to glutathione concentration. Firstly, the optimum conditions for the inhibitor biosensor were established. In the optimisation studies of the biosensor, the most suitable cucumber tissue and gelatine amounts and glutaraldehyde ratio were determined as*.14 1/7 ul tissue/cm2, 7.1 mg gelatine/cm2 and 2.5 %, respectively.Phosphate buffer(50 mM, pH 7.5) and 35 °C were established as providing the optimum working conditions.In the characterization studies, a linearity in the GSH concentration range 0.1-2 uM was obtained, when 600 uM ascorbic acid was used as a substrate. The repeatibility experiments (n=7) revealed that for 1.5 uM GSH, the average value ( x ) was 1.517 uM, standard deviation (S.D.) was4.72. 10"5 and variation coefficient (C.V.) was 3.11 %.Besides, thermal stability, inhibitor specification and storage stability of the biosensor were investigated.
Benzer Tezler
- Glutatiyonun Seçimli Ayırım ve Tayinine Yönelik Moleküler Damgalı Polimerlerin Hazırlanması ve kromatografik karakterizasyonu
Preparation and Chromatographic characterisation of molecularly imprinted polymer for the specific separation and determination of glutathione
AYŞE DİNÇER
- Fasciola hepatica ile enfekte koyunların kan ve karaciğer dokularında arginaz, nitrik oksit, bazı antioksidant enzimler ve lipid peroksidasyon düzeyleri ile karaciğer arginaz enziminin biyokimyasal özellikleri
Arginase, nitrik oxide, some antioxidant enzymes and levels of lipid peroxidation in tissues of blood and liver in sheep infected with fasciola hepatica and biochemical properties of arginase enzyme in liver
FULYA BENZER
Doktora
Türkçe
2001
Veteriner HekimliğiFırat ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF.DR. SEMA TEMİZER OZAN
- Development of a glutathione S-transferase-based biosensor for the detection of heavy metals
Glutatyon S-transferase temelli biyosensör geliştirilmesi
EBRU SAATÇİ
- Selenyumun glutatyon peroksidaz üzerine olan etkilerinin araştırılması
Investigation of selenium effects on glutathione peroxidase
İRFAN DEMİRBAŞ
Doktora
Türkçe
2004
Eczacılık ve FarmakolojiFırat ÜniversitesiFarmakoloji ve Toksikoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. İBRAHİM PİRİNÇCİ
- Yüksek basınçlı sıvı kromatografisi ile plazma homosistein ölçümümü ve klinik uygulamaları
Başlık çevirisi yok
ERDİNÇ ÇAKIR
