Gentisik asit ve p-klorovarfarin'in insan serum albuminine bağlanma özelliklerinin iki farklı yöntemle incelenmesi
A Study on the binding properties of gentisic acid and p-chlorowarfarin to human serum albumin by two different methods
- Tez No: 111867
- Danışmanlar: PROF.DR. NİLGÜN SÜMER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: insan serum albumini, gentisik asit, p-klorovarfarin, ligand bağlama, florimetrik titrasyon, ultrafiltrasyon, human serum albumin, gentisic acid, p-chlorowarfarin, ligand binding, fluorescence titration, ultrafiltration
- Yıl: 2002
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Sevinç, İ., Gentisik Asit ve p-Klorovarfarin'in insan serum albuminine bağlanma özelliklerinin iki farklı yöntemle incelenmesi, Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Biyokimya Programı Bilim Uzmanlığı Tezi, Ankara, 2002. Bu çalışmada, p-klorovarfarin ve gentisik asitin insan serum albumini (HSA)'ya bağlanma özellikleri; ultrafiltrasyon ve florimetrik titrasyon yöntemleri kullanılarak incelendi. Globulin ve yağ asiti içermeyen HSA ticari olarak sağlandı. Tüm deneyler 100 mM potasyum fosfat pH 7.4 tamponu içerisinde, 25°C'de yapıldı. Bağlanma parametrelerinin çalışılan yönteme bağımlı olduğu görüldü, p- Klorovarfarin için yapılan ultrafiltrasyon çalışmasında Ka (disosiyasyon sabiti) değeri 8.77 ± 0.94 uM, florimetrik titrasyon çalışmasında ise 2.78 ± 0.93 uM bulundu. Ultrafiltrasyon çalışmasında bağlanma stoikiyometrisi, n = 2.33 ± 0.94, florimetrik titrasyon çalışmasında elde edilen değerden, n = 1.13 ± 0.93 daha yüksek gözlendi. Gentisik asit için ise, florimetrik titrasyon deneylerinde Kd değeri 5.82 ± 0.98 uM bulunurken, bağlanma stoikiyometrisi 1.83 ± 0.98 gözlendi. Yapılan ultrafiltrasyon çalışmaları sonucu gentisik asitin HSA'ya bağlanma değerleri Scatchard grafiğine uygulanamadı. LB değerleri Lo değerlerine karşı grafiklendiğinde ise lineer bir eğri elde edildi. Bu gözlem gentisik asitin HSA'ya non spesifik olarak bağlandığım düşündürdü. Florimetrik titrasyon çalışmalarında bulunan p-klorovarfarinin HSA'ya bağlanma değerleri, bu konuda daha önce rapor edilen bulgularla uyum gösterdi. Bu çalışma p-klorovarfarinin HSA'ya bağlanma potansiyeli hakkındaki bilgileri güncellerken, gentisik asitin bağlanma stoikiyometrisi hakkında yapılacak ileri çalışmalara olan ihtiyacı da belirtmektedir.
Özet (Çeviri)
VI ABSTRACT Sevinç İ., A study on the binding properties of gentisic acid and p- chlorowarfarin to human serum albumin by two different methods, Hacettepe University Health Sciences Institute Master in Science Thesis in Biochemistry, Ankara, 2002. The aim of this study was to investigate the binding parameters of p- chlorowarfarin and gentisic acid to human serum albumin (HSA), using ultrafiltration and fluorescence titration methods. HSA, essentially free of globulin and fatty acids, was obtained commercially. All experiments were performed in 100 mM potassium phosphate buffer pH 7.4 at 25°C. The binding parameters were found to be method dependent. For p-chlorowarfarin, Kd (dissociation constant) value was found 8.77 ± 0.94 uM in ultrafiltration and 2.78 ± 0.93 uM in fluorescence titration. The apparent stoichiometry of binding was higher in ultrafiltration studies (n=2.33 ± 0.94) than in fluorescence titration (n=1.13 ± 0.93). On the other hand for gentisic acid, K<i value determined from the binding isotherms, in fluorescence titration experiments, was 5.82 ± 0.98 uM. The apparent stoichiometry of binding was found as 1.83 ± 0.98. Data obtained from ultrafiltration studies for binding gentisic acid to HSA could not be applied to Scatchard plots. Lb versus Lo plots were linear. It was concluded that, gentisic acid binding to HSA is non-specific. The data obtained from binding studies of p-chlorowarfarin to HSA in fluorescence titration experiments were in accordance with previous findings. Besides updating information relating to p-chlorowarfarin binding potential of HSA, this study also points out the need for further studies about the binding stoichiometry of gentisic acid.
Benzer Tezler
- Ege Denizi'nde yayılış gösteren Posidonia oceanica (L.) bitkisi üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
M. ZEKİ HAZNEDAROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiFarmasötik Botanik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. FERİHA AKARSU
- Kemik görüntüleme ajanlarının sentezi, kalite kontrolu ve biyodağılımları
The Bone seeking agents, snythesis QC and distribution
BUKET YAZAN