NAMPT ve PARP inhibitörlerinin prostat kanseri hücre hatlarının çoğalma hızına etkisi ve alınan cevabın miRNA ve IncRNA düzeylerindeki değişim ile korelasyonunun değerlendirilmesi
The effect of NAMPT and PARP inhibitors on the proliferation rate of prostate cancer cell lines and evaluation of the correlation of the response with changes in miRNA and IncRNA levels
- Tez No: 1001827
- Danışmanlar: DOÇ. DR. NAZİYE AK
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: İç Hastalıkları, Onkoloji, Internal diseases, Oncology
- Anahtar Kelimeler: NAD, Olaparib, Poli (ADP-riboz) polimerazlar, Prostat, Prostat neoplazmları, NAD, Olaparib, Poly (ADP-ribose) polymerases, Prostate, Prostatic neoplasms
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Giriş: Prostat kanseri, erkeklerde en sık görülen malignitelerden biri olup ileri evrede tedaviye direnç geliş imi önemli bir klinik sorun oluşturmaktadır. Son yıllarda DNA hasar onarım mekanizmaları ile hücresel metabolizma arasındaki etkileşimin, özellikle NAD⁺ biyokimyası ve PARP/NAMPT ekseni üzerinden, tümör hücrelerinin tedavi yanıtı ve direnç gelişiminde kritik rol oynadığı gösterilmiştir. Bu bağlamda PARP inhibitörleri ile NAD⁺ salvage yolunun birlikte hedeflenmesi, sentetik letalite ve metabolik kırılganlık oluşturabilecek yenilikçi bir yaklaşım olarak öne çıkmaktadır. Materyal ve Metod: Çalışmada PC3, DU145 ve LNCaP prostat kanseri hücre hatları ile normal prostat epitel hücre hattı PNT1A kullanılmıştır. Hücreler olaparib, NAMPT inhibitörü FK866 ve kombinasyon tedavisi (yarı IC₅₀ dozlarında) ile 48 saat tedavi edilmiştir. Sitotoksisite CCK-8 testiyle değerlendirilmiş, hücre içi total NAD (NAD⁺+NADH), NADH ve ROS düzeyleri biyokimyasal yöntemlerle ölçülmüştür. PARP1, NAMPT1, lncRNA H19 ile miR-34a, miR-130a ve miR-182 ekspresyonları real-time PCR ile analiz edilmiştir. Bulgular: Olaparib ve FK866 tüm prostat kanseri hücrelerinde doza bağımlı sitotoksisite oluşturmuş, LNCaP hücreleri daha yüksek duyarlılık göstermiştir. Olaparib PC3 ve LNCaP hücrelerinde NAD/NADH düzeylerini artırırken, FK866 ve kombinasyon tedavileri tüm hücre hatlarında NAD⁺ havuzunu baskılamıştır. Kombinasyon tedavisi özellikle PC3 ve LNCaP hücrelerinde metabolik kırılganlığı derinleştirmiştir. ROS yanıtları hücre hattına özgü olup, normal PNT1A hücrelerinde anlamlı değişiklik izlenmemiştir. Gen ekspresyon analizleri kombinasyon tedavisinin PARP1, NAMPT1 ve H19 üzerinde daha güçlü modülasyon oluşturduğunu göstermiştir. Sonuç: Bulgular, PARP ve NAMPT'in eş zamanlı hedeflenmesinin prostat kanserinde metabolik ve redoks homeostazını bozarak sitotoksik etkinliği artırdığını ve dirençli tümör alt tipleri için rasyonel bir terapötik strateji sunduğunu göstermektedir
Özet (Çeviri)
Introduction: Prostate cancer is one of the most frequently diagnosed malignancies in men, and the development of therapeutic resistance in advanced stages remains a major clinical challenge. Recent studies have demonstrated that the interplay between DNA damage repair mechanisms and cellular metabolism—particularly through NAD⁺ biochemistry and the PARP/NAMPT axis—plays a critical role in determining treatment response and resistance in tumor cells. In this context, simultaneous targeting of PARP inhibitors and the NAD⁺ salvage pathway has emerged as a novel therapeutic strategy capable of inducing synthetic lethality and metabolic vulnerability in cancer cells. Materials and Methods: This study utilized the prostate cancer cell lines PC3, DU145, and LNCaP, along with the normal prostate epithelial cell line PNT1A. Cells were treated with olaparib, the NAMPT inhibitor FK866, or their combination (at half IC₅₀ doses) for 48 hours. Cytotoxicity was assessed using the CCK-8 assay. Intracellular total NAD (NAD⁺ + NADH), NADH levels, and reactive oxygen species (ROS) were measured using biochemical assays. Expression levels of PARP1, NAMPT1, lncRNA H19, and microRNAs miR-34a, miR-130a, and miR-182 were analyzed by real-time PCR. Results: Olaparib and FK866 induced dose-dependent cytotoxicity in all prostate cancer cell lines, with LNCaP cells showing greater sensitivity. Olaparib increased NAD/NADH levels in PC3 and LNCaP cells, indicating a metabolic adaptive response, whereas FK866 and combination treatments markedly suppressed the NAD⁺ pool across all cell lines. Combination therapy significantly enhanced metabolic vulnerability, particularly in PC3 and LNCaP cells. ROS responses were cell line–specific, while no significant changes were observed in normal PNT1A cells. Gene expression analyses revealed stronger modulation of PARP1, NAMPT1, and H19 with combination treatment. Conclusion: These findings demonstrate that dual targeting of PARP and NAMPT disrupts metabolic and redox homeostasis more effectively than monotherapies, offering a rational and potentially selective therapeutic strategy for resistant prostate cancer subtypes
Benzer Tezler
- Yeni nikotinamit fosforiboziltransferaz (NAMPT) inhibitör adaylarının sanal tarama yöntemi ile keşfi ve biyolojik etkilerinin belirlenmesi
Identification of novel nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT) inhibitior candidates via virtual screening campaign and evaluation of their biological activities
FİKRİYE ÖZGENCİL
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Eczacılık ve FarmakolojiGazi ÜniversitesiFarmasötik Kimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÖKÇEN EREN
- Sıçanlarda prenatal VPA uygulaması ile OSB modeli oluşmasında NAD+ ilişkili sinyal yolaklarının olası etkileri
Potential effects of NAD+ related pathways on prenatal VPA induced rat model of ASD
SÜEDA TUNÇAK
- Tip 2 diyabet ve buna bağlı komplikasyonlarda NAMPT, IL-6 ve vaspin gen ekspresyonları ve serum protein düzeyleri
NAMPT, IL-6, and vaspin gene expressions and serum protein levels in type 2 diabetes mellitus and related complication
SÜHEYLA PINAR ÇELİK
- Yeni nikotinamit fosforiboziltransferaz (NAMPT) inhibitorü/sirtuin-1 (SIRT-1) aktivatörü hibrit bileşiklerin tasarımı, sentezi ve biyolojik aktivitelerinin belirlenmesi
Design, synthesis and evaluation of biological activities of novel nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT) inhibitor/sirtuin-1 (SIRT-1) activator hybride molecules
FİKRİYE ÖZGENCİL
- Tip 2 diyabetli hastalarda nikotinamid fosforibozil transferaz (NAMPT), interlökin-6 (IL-6) ve Vaspin'in gen polimorfizmleri
The gene polymorphisms of nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT), interleukin-6 (IL-6) and vaspin in Type 2 diabetes patients
DAMLA NUR PARILTI