Dondurulup-çözdürülmüş boğa spermasında indirekt sperm DNA fragmentasyon testleri (Toluidine Blue ve Chromomycin a3) ile DNA hasarı tespiti
Detection of DNA damage in frozen-thawed bull sperm by indirect sperm DNA fragmentation tests (Toluidine Blue and Chromomycin a3)
- Tez No: 1001587
- Danışmanlar: PROF. DR. MESUT ÇEVİK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ondokuz Mayıs Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tez çalışmasının amacı, dondurulmuş holştayn boğa spermasında iki farklı çözülme sıcaklığının temel spermatolojik parametreler ve sperm DNA bütünlüğü üzerindeki etkilerini belirlemek için Toluidine Blue (TB) ve Chromomycin A3 (CMA3) boyama yöntemlerini karşılaştırmalı olarak değerlendirmek olmuştur. Çalışmada, aynı üretim tarihli ve damızlık olarak üstün nitelikli bir boğadan elde edilen dondurulmuş sperma payetleri kullanılmıştır. Toplam kırk (40) payet, farklı çözme yöntemleriyle iki gruba ayrılarak "37°C'de 30 saniye (yavaş) ve 70°C'de 6 saniye (hızlı) kullanılmıştır. Spermatozoa motilitesi, progresif motilitesi, canlılık, morfoloji ve yoğunluk değerleri Bilgisayar Destekli Sperm Analiz Sistemi (CASA) kullanılarak değerlendirilmiştir. Plazma membran bütünlüğü hipoozmotik şişme testi (HOS testi) kullanılarak değerlendirilmiştir. DNA hasarı analizi, Toluidine Blue (TB) ve Chromomycin A3 (CMA3) boyama yöntemleri kullanılarak yapılmıştır. Farklı çözme prosedürleri, spermatozoon total motilitesini etkilemekle birlikte, progresif motilite ve sperm kinematik parametrelerinde istatistiksel olarak önemli bir farklılık oluşturmamıştır (P>0,05). Çözme yöntemleri farklılığı sperm plazma membran bütünlüğü, canlılık ve kuyruk morfolojik bozuklukları yönünden de önemlilik ortaya koymuştur (P<0,05). Ancak, Toluidine Blue (TB) ve Chromomycin A3 (CMA3) boyama yöntemleri kullanılarak DNA hasarı oranlarının tespiti açısından istatistiksel olarak bir farklılık ortaya konulamamıştır (P>0,05). Bu durum, boğa spermasının protamin yapılanmasının yoğun bir şekilde korunmuş olmasından kaynaklanmış olabilir. Sonuç olarak, farklı çözdürme yöntemleri uygulanan boğa spermasında bazı temel spermatolojik parametreler etkilenmekle birlikte, spermatozoon DNA hasarının tespiti yönünden önemli bir farklılık tespit edilememiştir. Saha koşulları ve laboratuvar şartları açısından 37°C'de 30 saniye süreyle çözdürme işlemi en ideal olan yöntem olarak kabul edilebilir.
Özet (Çeviri)
The aim of this thesis study was to comparatively evaluate Toluidine Blue (TB) and Chromomycin A3 (CMA3) staining methods to determine the effects of two different thawing temperatures on basic spermatological parameters and sperm DNA integrity in frozen Holstein bull semen. In the study, frozen semen straws obtained from a bull of superior breeding quality with the same production date were used. A total of forty (40) straws were separated into two groups using different thawing methods: 37°C for 30 seconds (slow) and 70°C for 6 seconds (fast). Spermatozoa motility, progressive motility, viability, morphology, and concentration values were evaluated using a Computer-Assisted Sperm Analysis System (CASA). Plasma membrane integrity was assessed using the hypoosmotic swelling test (HOS test). DNA damage analysis was performed using Toluidine Blue (TB) and Chromomycin A3 (CMA3) staining methods. Different thawing procedures affected total spermatozoon motility but did not create a statistically significant difference in progressive motility and sperm kinematic parameters (P>0.05). Differences in thawing methods also showed significance in terms of sperm plasma membrane integrity, viability, and tail morphological abnormalities (P<0.05). However, TB and CMA3 staining methods did not significantly affect sperm plasma membrane integrity, viability, and tail morphological abnormalities. No statistically significant difference was found in the detection of DNA damage rates using CMA3 staining methods (P>0.05). This may be due to the high degree of preservation of the protamine structure in bull sperm. In conclusion, although some basic spermatological parameters were affected in bull sperm subjected to different thawing methods, no significant difference was found in the detection of spermatozoon DNA damage. Thawing at 37°C for 30 seconds can be considered the most ideal method in terms of field and laboratory conditions.
Benzer Tezler
- Bilgisayar destekli sperma analizi sırasında spermanın hazırlanmasındaki bazı farklılıkların ve sistemik ayar değişikliklerinin dondurulmuş boğa, aygır ve koç spermasının çözdürme sonrası sperm motilitesi ve kinematik parametrelerine etkisi
The effect of certain differences in sperm preparation and systemic adjustment changes during computer-aided sperm analysis on sperm motility and kinematic parameters of frozen bull, stallion, and ram sperm after thawing
FATMA FIRAT DANİŞ
Doktora
Türkçe
2026
Veteriner HekimliğiFırat ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA SÖNMEZ
- Dondurulmuş çözdürülmüş holştayn ırkı boğa spermasının morfoloji tespitinde farklı metodların karşılaştırılması
Comparison of different methods in determining the morphology of frozen-frosted holstein bull sperm
İSMAİL YAMAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Veteriner HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ESER AKAL
- Dondurulmuş çözdürülmüş simental boğa spermasının akrozom bütünlüğünün farklı boyama metodları kullanılarak değerlendirilmesi
Evaluation of acrosomal integrity of frozen-thawed simmental bull sperm using different staining methods
EMRE KARA
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Veteriner HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MESUT ÇEVİK
- Boğa spermasının kriyoprezervasyonunda trehaloz, troloks ve pentoksifilinin spermatolojik parametreler üzerine etkilerinin değerlendirilmesi
Effects of trehalose, trolox, and pentoxifylline on spermatological parameters during bull semen cryopreservation
RAMAZAN ACAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2026
Veteriner HekimliğiAksaray ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. CANER ÖZTÜRK
- Farklı sıcaklık ve sürelerde çözdürülen dondurulmuş boğa spermalarının casa parametreleri ile değerlendirilmesi
Evaluation of bull semen frozen and thawed at different temperatures and time periods with casa parameters
AYŞE DEMİRHAN
Doktora
Türkçe
2020
Veteriner HekimliğiAnkara ÜniversitesiDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ONGUN UYSAL